琼脂糖凝胶电泳跑成这样是怎么回事？

Question

只有Marker有条带。。。其他道的地方都是整片整片的荧光。。。
希望前辈们能给我解释一下出现这种情况的原因（原理）？

Answer 1

根据我多年的经验，少年，你的胶背景亮说明你的UV开得太亮了，正常时候不需要这么强光就能看到条带。

从你胶的样子可以看出，你跑胶的时间太长了，看样子你用的是SYBR green，这种染料在你电泳的时候是会向条带相反方向移动的，跑时间太长，造成你的胶这样下面一部分已经看不到marker和背景亮光了。而过长时间跑胶造成的温度升高（拿在手里热乎乎的软软的，听起来像便便。。。），使胶中的样品和染料很多都扩散出去了，造成你的maker和条带整个的不够亮。

从你marker的位置可可以看出你跑胶的时间很长，因为最大的条带的位置比较低了。

即使你的背景这么强，也可以看出在你样品孔的下方很近的地方有条带，我不知道你样品的大小和来源，但是可以给出以下几个可能原因：

你的loading buffer不正确，造成样品条带异常移动

最可能原因是你的样品中DNA就那么大。如果你是提取质粒的话，你做错某步，把细菌的核DNA提取出来了，所以才那么大。你做错的可能是裂解那步，裂解时间超过5分钟了或者你剧烈混合裂解液和细菌了，只有invert就可以了。

你上样量也要保证，测一下浓度，一般200ng的条带就非常亮了。

跑胶时候，电压一般80-120，可以低，也可以高到200，但是室温下推荐80-100。时长20-60分钟为宜，一般推荐30分钟，不过你可以跑一段时间拿出来UV照一下，这时候你可以看到条带，如果分得不够开，再放回去跑一会就好了。如果实在需要长时间跑，放4度跑。

Answer 2

电泳条件不合适。电泳时电压不应超过20 V/cm，温度＜30℃,巨大DNA链，温度应＜15℃，核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力。

Answer 3

1可能，你就没有pcr成功，其他孔没东西。
2可能，胶里面的荧光显色剂含量太低。
我觉得，你很有可能啥的没pcr出来。重新来吧