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琼脂糖凝胶电泳跑不动
为啥我的DNA在
琼脂糖凝胶电泳
中
跑不
下来?
答:
1.75V电压,300mA的电流,这电流是不是有点太大了?
可能需要更换一下电泳液
。2.你说是提的基因组DNA,这个基因组DNA是多少bp的?1%的胶一般对应的500bp-1000bp左右的目标基因。你这个条带稍微跑出来一点,有可能是目的基因太大,目标基因的大小好歹也得在选用marker的范围之内。3.胶配的倒是挺好...
琼脂糖凝胶电泳
图上样孔中的条带
跑不
出来怎么回事?
答:
点样没点好或者制孔没制好,样品没提出DNA根据目的条带长度来调整
凝胶
浓度,一般1.5%左右,也不一定。紫外灯下没见带,不一定没有出孔,而是量少看不到,可以测一下浓度看一下,或直接试跑一下PCR。
电泳
时间可能过长,一般75v×30min左右,但是具体看溴酚蓝得离孔距离和目的条带离孔距离。利用...
对环状质粒
琼脂糖凝胶电泳
的时候分子量大的
跑不
开的原因
答:
解决之道:给你的DNA溶液中加入氯仿,混匀,离心或者静置使分层,取上清液(不要贪
,不要完全彻底取完)再上样电泳就应该好了。原理:氯仿会使水溶液中的蛋白质杂质变性,变形蛋白由于双亲性,存在于油水分层界面之处,如果蛋白很多,界面会呈现肉眼可见的白色甚至淡黄色。
为什么我DNA跑
琼脂糖凝胶电泳
时
跑不
出孔
答:
应该是电泳的问题了
,你也跑过很多次了,操作没有问题的话那就是该换电解液了,就是TAE或者其他的,跑的时候你观察下电泳槽里正负极是不是有那种冒小气沫出来,还有就是电解液不正确,比如你用了50×的电解液误当1×的了,
跑
琼脂糖凝胶电泳
的时候loading buffer 没跑出去是什么原因
答:
如果是水平方向的话,那是因为跑的时间没有足够久
,一般我们都不会跑那么久让他跑出去的,那样不只浪费时间还影响实验。如果你是指上下垂直表面的话:是因为跑电泳时候是在一个水平的电场中进行的,电源正负两极之间的电场也是水平方向而不是弯曲的,loading buffer混合的样品中的电子当然也是顺着电场的...
求助
琼脂糖凝胶电泳
MARKER就是
跑不
开的原因
答:
DNA
电泳
一定要使用DNA Marker或已知大小的正对照DNA来估计DNA片段大小。Marker应该选择在目标片段大小附近ladder较密的,这样对目标片段大小的估计才比较准确。需要注意的是Marker的电泳同样也要符合DNA电泳的操作标准。如果选择λDNA/HindIII或者λDNA/EcoRI的酶切Marker,需要预先65℃加热5min,冰上冷却后...
琼脂糖电泳跑不
了胶
答:
一般PCR或RT-PCR的产物
电泳
时应该用>1%的
琼脂糖凝胶
进行电泳, 事实上,很多情况下胶跑得不够漂亮跟一些微不足道的细节有关,有时候做胶前如果梳子没洗干净,胶的孔就不够整齐; 还有点样时,不要让枪头戳到孔的边沿,尤其是前沿,如果戳缺一点。
质粒DNA
琼脂糖凝胶电泳
后样品扩散和样品几乎没有泳动、凝胶扩散的的原因...
答:
你样品是不是靠近负极那一端了 一般缓冲液ph都是大于dna等电点的 一般是从负极到正极跑的 如果你样品放到负极附近来
电泳
他基本就往反方向 不往你
琼脂
那边跑了 你看看是不是这个原因
为什么我DNA跑
琼脂糖凝胶电泳
时
跑不
出
答:
DNA提取产物经
琼脂糖凝胶电泳
条带有两条是怎么回事 “从头拖到尾,另外一对引物就能做出来”说明不是引物之间形成二聚体,而是第一对引物的设计有问题(特异性很差).如果一定要扩增那个区,建议引物的位置向两边放一放.如果你没有好的设计软件,建议到Primer3去试试(目前最好的免费引物设计).如果还是...
在做
琼脂糖凝胶电泳
时,如果胶的浓度不合适,会发生什么情况
答:
一般要根据要
电泳
分离的核酸的分子量大小:分子量大的核酸电泳时使用浓度较小的
凝胶
,分子量小的核酸电泳时使用浓度较大的凝胶.核酸在浓度越大的凝胶中电泳速度越小.如果胶浓度偏高,可能
跑不动
,如果胶浓度偏低,可能跑得太快,分不开.可以查到核酸分子大小与
琼脂糖
浓度范围的对应关系.
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