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酶切buffer的选择
...I 与Fermentas的BstBI的双
酶切
?如何
选择buffer
?如何进行分步酶切...
答:
怎么是两个不同公司的呢。。。分步
酶切
吧。。。比如先用Takara的体系BamHI 先切一下,我一般过夜酶切,然后酚-氯仿抽一下DNA,然后再用Fermentas的体系 BstBI切过夜。。。
cutsmart
buffer的
作用
答:
增强酶的稳定性、提高酶反应效率。1、增强酶的稳定性:高浓度的氯化钠和乙酸可以抑制
内切酶的
活性,使酶保持最佳的
酶切
活性。2、提高酶反应效率:高浓度的Tris-HCl和乙酸钠可以提供适宜的pH环境,使内切酶保持最佳的酶切活性。
双
酶切的
20μL反应体系和反应时间如何确定?最好是说明原理。所用的...
答:
模板DNA 几百ng-几ug,区别不大 酶1 0.5ul 酶2 0.5ul buffer 去Takara产品目录查双
酶切buffer
表,按照那个倍数加,有时候需要BSA 水补足 20ul 30或37度,1-5小时都可以。有个别酶需要55度。注意,酶别加多了,甘油浓度过高影响酶的活性。反应体系中甘油浓度要小于1%,而酶是...
...要做Xbal和XhoI双
酶切
实验,想请问一下
buffer
建议中2XTango是什么意 ...
答:
登录到fermentas的网站上最上方,在tool部分有一个Doubledigest的工具,点击点击进去以后,把你要切的两个
酶
勾上,提交,就会给出相应的
buffer的
建议。We recommend:Buffer 2X Tango™2-fold excess of XbaI XhoI Incubate at 37°C 而且还可以看到每一种酶在此buffer中的活性,由于XbaI在2XTango...
...BamH I ,但是最适合温度一个37一个30,
BUFFER选的
是1.5T,想问下温 ...
答:
建议使用37度,因为BamH I在37度活性也是很高的,只是不如30度稳定。你可以参见商品目录A-12页。
请问,
酶切
中的NE
Buffers
是什么意思?
答:
NE
Buffers
是NEB这个公司(New England Biolabs)生产的
酶的
缓冲液(
buffer
)。
请教高手10*
buffer
,2*buffer,1*buffer是什么意思啊?双
酶切
时他们之间...
答:
10*的就是十倍浓度的 比如说你要配50ul体系 那就加5ul的10*
buffer
其他同理
内切酶
体系为什么最后加酶?
答:
放心,没有,我个人认为加的顺序没那么重要
酶切
体系中各物质neb 酶 缓冲液
buffer的
作用?
答:
1.NEB 酶为限制性
内切酶
,对目的片段特异性序列进行识别与
酶切
;2.
Buffer的
作用是维持反应体系的酸碱度的稳定。
在XhoⅠ和XbaⅠ限制性
内切酶
双
酶切
体系中,反应体系是什么?或者这两种酶...
答:
反应体系应该指的是,两种酶同时使用时,应该用的
buffer
系统,且每一种酶的用量,DNA的用量,以及保证酶量不超过总反应体积的1/10,即20ul体系中,两个酶的总量不能超过2ul。你可以在
内切酶
公司网站上查到推荐的反应体系:从图上看,这两个酶在不能再另一个酶的推荐buffer中使用,只能用2X Tango ...
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