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配胶时sds加少了会怎么样
平时实验没有做成功|我成功了做实验
答:
5. 做
SDS
-PAGE的时候,除了蛋白量上样一致,最好体积也一致,这样跑出来的胶各个泳道之间的band能做到一样宽,方便后面的比较,特别是WB。做法就是拿1X的上样缓冲补全要加的样做到体积一致,否则跑出来会有的宽有的窄,特别是上样体积相差较大的。 6. 在把蛋白胶做成干
胶时
,很多时候会因为有气泡使胶裂掉,我的...
配制
sds
-page凝胶需要注意什么
答:
配制
sds
-page凝胶需要注意凝胶制备的过程很简单,但是凝胶一定要均匀无气泡,取出梳子
的时候
一定要小心,放置将
胶
孔戳破。
SDS
-PAGE蛋白电泳
配胶
不凝固
答:
1,多加过硫酸铵试试 2,多加点TEMED,可加速凝固 3,配好
胶
后放在温箱里凝的快些,环境温度低会影响凝的速度。我在冬天会灌好胶后放在培养箱里,一般很快就凝了,可以提高效率,一天最多可以跑5次。最后,经常出现浓缩胶凝但不成形,非常粘,这是因为C液(浓缩胶缓冲液)的pH值不对,重新配制...
SDS
-page 梳空
怎么
插才不会有残
胶
答:
在做浓缩
胶的时候胶
不要加的太满,因为要加梳子会有胶溢出,胶两侧的残胶会很多,处理起来也麻烦,
加的时候
要留点空余,插入梳子刚刚满为最好。提高
SDS
-PAGE电泳分辨率的途径?1、聚丙烯酰胺的充分聚合,可提高凝胶的分辨率。建议做法:待凝胶在室温凝固后,可在室温下放置一段时间使用。忌即配即用或...
SDS
-Page电泳,我配的
胶
总是不凝固
答:
应该是pH有问题。如果pH不合适,即使加再多TEMED和过硫酸铵都不管用,即使凝了,跑胶也不顺利。
SDS
-PAGE的不同浓度的配方有没有什么计算方法,潜在规律
答:
配10%的
胶
10ml,当然用3.33ml 30%的arc-bis储液,1.5M的分离胶缓冲液是4倍的,所以用2.5ml,10%
SDS
100ul,10%AP100ul,补水至10ml即可。
如何
跑出漂亮的
SDS
-PAGE电泳图
答:
蛋白胶啊,我的经验是三点。第一,
配胶的时候
要充分混匀。如果是双层胶,配完下层加水封的时候,一定要缓慢滴加,均匀封压,歪一点的话就不太好了。第二,尽可能低电压长时间的跑,这样条带比较平比较好看。第三,不到万不得已,不要用最旁边的泳道,基本上一定会斜的...祝实验顺利。
电泳加入
sds
的作用
答:
形成
SDS
-蛋白质负离子,这样就使电泳迁移率只取决于分子大小这一因素。据经验得知,当蛋白质的相对分子质量在17000-165000之间时,蛋白质-SDS复合物的电泳迁移率与蛋白质相对分子质量的对数呈线性关系,于是根据标准蛋白质相对分子质量的对数和迁移率所作的标准曲线,可求得未知蛋白质的相对分子质量。
SDS
电泳问题 急急急 在线等~
答:
离心是为了除去杂质,否则跑出来的
胶
可能脏,不清楚,难看,或者对蛋白有影响。
加样
没必要多加,能看清就行,加多了条带可能比较宽,算迁移率时不精确 最后蛋白测大了,不太清楚,是不是与你跑的特定的什么蛋白有关呢
关于
SDS
-PAGE电泳
答:
1.一般来说,
加样
孔还是足够深的应该有(1cm),如果觉得比较浅可以多加一点浓缩
胶
,用来压制胶水平的水或乙醇一点点就可以了。2.如果只是两边的孔走样,中间的没问题的话,两边的孔加样后条带不直,很可能是电泳槽下面的气泡没有排尽,或者根本就没有注意下面有气泡,另外在电泳过程中因为会产生热...
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配蛋白胶sds和ap加多了
跑蛋白上层胶少会有影响嘛
wb制胶没加sds
配胶sds加多了