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rna可以用dna的胶跑吗
TRIzol法提取
RNA
如何避免
DNA
污染
答:
植物
RNA
本来就比价难提取,TRIzol提取时裂解要充分 剧烈震荡,分层静置,离心之后自然就分为两层,取RNA层的时候吸取一定要小心,吸得时候一定要缓慢,不要怕浪费,有的人吸得很多,很怕浪费,结果就吸到了中间层和下层,个人觉得吸取80%最多了,再多就很容易吸到杂质了,操作要小心,动作快速准却,这样才能提到...
我提的质粒在0.8%的琼脂糖电泳中,跑完后条带不清晰,不知道是什么原因...
答:
首先你
跑胶
的Marker呢?电泳一定要用一个道跑Marker,以确定你的目标
DNA
(质粒)大小以及你的琼脂糖胶和缓冲液没有问题。如果你的Marker跑出来没有问题,从上图看应该是你的质粒DNA浓度太高,最好质粒上样总量在500ng左右,不要超过1000ng。目标条带浓度过高容易造成拖带。最后,质粒由于是环状,超螺旋...
回收
dna胶
时若要稀释是用depc水稀释吗
答:
DNA
比较稳定,DEPC主要是处理RNase的,在
有RNA
样品时使用。不太明白,如果是胶回收,一般都直接用试剂盒,里面带的buffer就
可以用
。你说的应该是回收以后的稀释吧。主要看稀释后样品做什么用,一般用超纯水稀释就可以了。
琼脂糖凝胶电泳时如果提取的
DNA
中含有蛋白质和
RNA
污染应如何解决...
答:
蛋白污染
可以
考虑用酚氯仿多抽提几次,记得吸上清的时候小心点,宁可浪费也别吸到界面。一般后续还需要用氯仿/异戊醇抽提来去除酚。这样基本蛋白污染就可以去干净。实在不行,抽提一次后,就用蛋白酶K消化30min,再抽提。如果
DNA
多,
RNA
污染就添加RNase A消化,你可以中途取少量
跑胶
检测,RNA去干净了再...
同位素检测方法在
DNA
/
RNA
打点杂交中的应用如何?
答:
聚丙酰胺凝胶常用于14C/35S标记的蛋白质合成实验,通过放射自显影(对于最大灵敏度)或闪烁计数,测量蛋白质的合成和定位。硝酸纤维素膜和滤纸常用于14C/35S、32P和125I的放射自显影,其中32P由于增感屏的应用,
能
提供更高的分辨率。对于
DNA
/
RNA的
研究,如序列测定和打点杂交,32P标记的放射自显影是常用...
既然RNA病毒
能够
逆转录得到
DNA
,该DNA又
可以
转录出RNA,那为什么还有
RNA的
...
答:
首先要说的是并非所有
RNA
病毒都是逆转录病毒。其次逆转录病毒一般不以RNA复制的方式复制基因组,而是逆转录、再转录形成新RNA基因组。最后,你说的那个是重组慢病毒载体,那是人工改造的已和自然情况下的不同了。它的分成三个
DNA
质粒供操作者操作,但最终被包装到病毒颗粒中的是其中一个转录出来的RNA。
DNA
与
RNA
鉴别与提取是所需要用到的试剂
答:
常规的鉴定包括:1. 凝胶电泳鉴定
DNA
或RNA大小是否正确,样品是否有降解等;需要的试剂包括琼脂糖,EB或其他核酸染料,DNA/RNA Marker。当然还需要配套的仪器。2. 紫外分光光度计检测DNA或
RNA的
浓度和纯度;这个不需要特别的试剂,但需要紫外分光光度计,一般检测OD260与OD280的吸光值。
如何排除
DNA
溶液中,
RNA
和蛋白质的干扰
答:
如何排除DNA溶液中,
RNA
和蛋白质的干扰 苯酚
可以
使蛋白质变性,可以用于抽提纯化DNA,但苯酚的氧化产物可以使核酸链发生断裂。所
使用
的苯酚在使用前必须经过重蒸,且都必须用0.1mol/LTris-HCl (pH7.6)进行平衡。 再利用碱水解RNA而不水解
DNA的
特性,进行碱水解后分离即可。RNA提取步骤:1. 匀浆处理...
DNA
与
RNA的
提取分离,后续如需对其进行检测定性应用什么方法?
答:
原位杂交(ISH):ISH是一种用于检测细胞或组织中特定
DNA
或
RNA
序列的方法,
可以
在组织切片上进行定性分析。Northern Blot和Southern Blot:Northern Blot用于检测RNA,Southern Blot用于检测DNA,通过电泳分离核酸,然后进行杂交检测特定序列。荧光原位杂交(FISH):FISH是一种用荧光标记的探针对细胞中的DNA或...
trizol提取烟草叶片总
RNA
后,做RT-PCR,两次
跑胶
后的检测结果不一致,求 ...
答:
是说做完PCR,
跑胶
结果不一样?意思是出来的
DNA
片段大小不同?
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