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质粒酶切前后一样
提取
质粒酶切
后,双酶切和单酶切电泳条带
一样
,是怎么回事啊?
答:
双
酶切
切除的小片段很小 跑到凝胶以外了 大片段几乎与与原来大小一致 自然电泳条带就会和单酶切差不多了
质粒
切开与未切开大小
答:
质粒切开比未切开小
。单酶切后,质粒变为线形,相对没切的质粒电泳速度会有变化,跑胶发现比原始质粒变小。原始质粒,单切的两个条带一样大小,但是比原始质粒跑的慢,双切的如果有连入片段,就会是两条带,一小一大,如果没有连入片段,应该跟单切位置差不多大。质粒广泛存在于生物界,从细菌、...
质粒
上有两组
相同
的
酶切
位点,越远越容易切开吗
答:
酶切
位点
前后
有一定数量的碱基可以保证酶活性单元有效结合,并有效进行酶切反应,一般情况下稍微远点是会更有效,但是如果你使用的酶存在星活性或其他钝化特性,那就要好好看看了~
酶切质粒
时,怎样鉴定质粒是否被切开了啊?
答:
回答:根据说明书,确定
酶切
条件,温度,时间一般是2到3个小时,或者难切一点的过夜完后加入loadingbuffer,跑琼脂糖凝胶电泳,一般分以下几个孔,marker ,原始
质粒
, 一个酶单切,另一个单切, 两个酶双切单切的两个条带
一样
大小,但是比原始质粒跑的慢双切的如果有连入片段,就会是两条带,一小一大如果没...
质粒
双
酶切
后怎么会这个样子
答:
酶切后,因为超螺旋状态的质粒被切成线性,所以条带会有一条条带.如果是双酶切
,或是质粒上的酶切位点比较多的话,会有两条或更多条带.重组质粒是把载体质粒酶切开,连接上PCR片段,然后转化感受态细胞,培养后提质粒获得的,这一系列过程中都无法检测目的基因是否连接成功了,是否转化成功了,只有对...
我想问一下为什么
质粒
DNA的双
酶切
结果每次都和其中一种酶单酶切的结果...
答:
你是怎么检测结果的啊,电泳么?可能是
酶
已经失效了吧,毕竟那个对温度很敏感的
质粒
双
酶切
后怎么会这个样子
答:
质粒酶切
后,和没有酶切的对照相比.应该会多出一条带,这条带应该是跑得最慢的,也就是显得比原来的更大.酶切的不彻底的话,原来的那几条带也可能存在wjswj(站内联系TA)酶切之前你看到的应该是超螺旋,所以显的比较小:)zbq-92(站内联系TA)超螺旋的跑的最快,其次是线性的DNA,最后跑的最慢的...
分别比较
酶切前后
的
质粒
和基因组DNA;酶切后的质粒和基因组DNA有何不同...
答:
想问问你是用什么方法比较?本质上来说,
质粒
是环状的,基因组是超螺旋,而
酶切
后都是线状片段。电泳检测来说,质粒根据其螺旋形式不同,可以跑成2-3条带,基因组则是一大团,而酶切后,都会变成明亮的、分界明显的线状片段,跑成梯子
一样
的结果。
为什么切割DNA和
质粒
要用同一种限制
酶
啊?不
相同
的粘性尾端不能结合...
答:
酶切
之后,根据酶的性质,产生粘性末端或者平末端。粘性末端就是常见的双链末端序列不
一样
长的末端,平末端就是你说的“直切”,切后双链末端一样长。粘端连接必须要求粘端的序列
相同
,否则碱基无法完全配对,也就无法连接。即使如此,如果两个酶是“同尾酶”,即两个酶虽然识别的位点不一样,但是...
质粒酶切前后
电泳结果有什么不同
答:
如果是双
酶切
,而且片段大小适中,可以看见酶切的片段和载体,还有未切开的
质粒
。能不能区分超螺旋质粒和开链质粒,和所用琼脂糖凝胶的浓度,电泳时间,DNA纯度有关。试着延长跑胶的时间,应当是有区别的。酶切之前就有几条带,可能是因为质粒样品中有杂带,来源于杂菌或者降解。
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质粒单酶切三条带
酶切质粒载体
质粒酶切时间
质粒酶切体系