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蛋白胶浓度越高区分度越好
wb
胶
的
浓度
答:
根据目的
蛋白
的分子量大小选择不同浓度的分离胶,8%、12%和15%三种浓度的分离胶就完全可以搞定日常蛋白的测定。一般测定100kDa分子量以上的蛋白可选择8%浓度的分离胶;测定20kDa分子量以下的蛋白可选择15%浓度的分离胶,中间的分子量可选用12%浓度的分离胶。有的时候蛋白跑不出来,其实未必是分离
胶浓度
...
选择
浓度
多少的SDS-PAGE
胶
好
答:
选择浓度多少的SDS-PAGE胶并没有好坏的区分,而是只有是否合适的区分 不同浓度的SDS-PAGE胶的分辨率并不相同
,所以适合分离的目的蛋白分子量也不太相同。所以需要根据需要检测蛋白分子量去选择不同浓度的SDS-PAGE胶 具体如下表所示
wb
蛋白
样品弄混怎么
区分
答:
区分
不了,除非有分子测定仪可以测定出分子质量和构成来确定哪种蛋白是哪种蛋白,否则的话只能重新做一份了,下次一定注意把WB蛋白的区别放置,当进行接触滤纸、凝胶和膜的操作时,应戴手套。手上的油脂会阻断转移,提蛋白一定要过硬,不能吝惜蛋白酶抑制剂,测定
蛋白浓度
一定要选好方法,最重要的,wb的...
Western blot 实验技术及常见问题分析?
答:
答:胶浓度不适合,高分子量要用低浓度胶,小分子蛋白要用高浓度胶
。 26有非特异性条带?答:目的蛋白有多个修饰位点(磷酸化位点、糖基化位点、乙酰化位点等),本身可以呈现多条带;一抗特异性不好,换用特异性较好的单克隆抗体;二抗非特异性引起的结果,可设立一组不加一抗只加二抗的平行对照来检测二抗是否有非特异...
琼脂糖凝胶电泳具体操作步骤是什么?需要注意什么事项?
答:
2、
高浓度
的
胶
可能使分子大小相近的DNA带不易分辨,造成条带缺失现象。3、电泳缓冲液多次使用后,离子强度降低,pH值上升,缓冲性能下降,可能使DNA电泳产生条带模糊和不规则的DNA带迁移的现象。4、如果电泳时电压和温度过高,可能导致出现条带模糊和不规则的DNA带迁移的现象。特别是电压太大可能导致小...
怎么鉴定胶原
蛋白
是否有添加剂啊
答:
可将胶原
蛋白
肽按比例5%的
浓度
(在透明的玻璃杯中,把5克的胶原蛋白肽溶于95毫升的水中,普通温度即可)等完全溶解,再倒入一杯100毫升的清水或矿泉水,对比观察两个玻璃杯里液体的颜色。看到溶液接近无色(清水的颜色)的胶原蛋白肽品质
越好
。好的胶原蛋白肽溶液(5%)的颜色就接近无色,清澈透明状态,...
卵壳是属于细胞膜的么?鸡蛋放于
高浓度
溶液为何不会质壁分离?
答:
周围的卵黄为脂肪、微量元素、少量
蛋白质
,外面的卵白的蛋白质冻
胶
。 因为蛋白质本身具有胶体渗透压,因此,在
高浓度
溶液(非胶体渗透压)的环境中短时间内改变不明显。如果浓度过高,超过蛋白质的胶体渗透压,也是会脱水的。受精的鸡蛋因情况不同可以是单细胞至16胚细胞。但细胞依然位于卵黄区域。
电泳对电压和电流有要求吗
答:
1、凝胶的浓度,配
胶浓度越高
,胶中的孔径越小,阻力越大,自然需要更高的电压来保证泳动的速度。2、目标条带的大小差值。电泳本质就是在均匀电场内,带电粒子受位移力相同,但是不同大小的分子在胶中阻力不同,速度不同,从而
区分
出不同长度(大小)的条带,并进行观测。电压越大——电场越强—...
实验技能方面
答:
浓度
不是
越高越好
,浓度太高会导致大量的非特异性结合。 2.引物(10 μmol/L) 引物浓度通常是10 μmol/L。 引物浓度太低,产量较低; 引物浓度太高,引起错配、非特异性以及引物二聚体。 3.Taq酶(5 U/μL) U是酶活力单位,定义为:25℃下(其它为最适条件),1分钟内能转化1 μmol底物的酶含量,或是转化...
生物科研实战——Western blot
答:
(5)根据测定的
蛋白浓度
用RIPA裂解液将不同样品平衡同一浓度 3.蛋白样品变性处理 试剂:SDS-PAGE蛋白上样缓冲液 (1)将汉恒5X样品缓冲液与蛋白样品4:1混合后涡旋振荡混匀 (2)将蛋白样品置于95℃水浴锅中水浴10min (3)蛋白样品配置完毕可置于-20℃以下保存备用 4.蛋白PAGE胶的配制 (1)玻璃...
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