高效液相色谱法( HPLC)的流动相如何选择?

如题所述

高效液相色谱仪(HPLC)中流动相的选择涉及到多种因素,甲醇与水80:20的比例是一种常见的流动相组成,被广泛用于很多分析方法。这种比例的选择主要基于以下几个原因:

溶解性能和极性调节:

    溶解性能:

    甲醇和水的混合物具有较好的溶解性,能够溶解多种化合物,尤其对于不同极性的化合物有良好的溶解性,使其在分析中能够被有效地携带和分离。

    极性调节:

    80:20的甲醇和水组合提供了适度的极性,这对于分离样品中极性不同的化合物非常有帮助。该比例使得色谱柱既能有效地分离不极性物质,又能较好地分离极性物质。

    分离性能和分辨率:

    分离性能:

    甲醇和水的80:20比例通常能够提供较好的分离性能,对许多化合物的分离效果较好,这有助于保持良好的分辨率和峰形。

    保持分辨率:

    这种组合的流动相对于很多化合物而言具有适度的极性和流动性,能够在保持分辨率的同时提供足够的移动速度,使得分析过程既能较快完成,又能得到良好的分离效果。

    可重复性和稳定性:

    可重复性:

    经过长期实践验证,甲醇和水80:20的组合在不同的分析条件下通常能够提供稳定且可重复的分析结果。

    常用性:

    这种组合被广泛采用,因为它在很多分析中都能够取得良好的结果,而且实验室通常也能够轻松获得这些溶剂,使用起来比较便捷。

    注意事项:

    流动相的选择通常也会受到实验样品的特性、目标分析物的性质、柱子类型和填料等因素的影响,所以在实际应用中可能需要根据具体的分析需求进行调整和优化。

    每个实验室的条件和实验要求都不尽相同,因此也可能会有其他流动相比例的使用,这需要结合实际情况和经验进行选择。

总的来说,甲醇与水80:20作为HPLC流动相组合,通常能够提供较好的溶解性、适度的极性、良好的分离性能和稳定的分析结果,因此在实验中被广泛采用。

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