对即将进入实验室养细胞的同学,您有没有什么建议或者值得分享的经验啊?谢谢
追答首先看你的实验室条件了,之前我们养细胞很多东西都不是一次性的,所以灭菌很关键。但现在应该大多数耗材都是一次性的,这就可以提高效率了,同时也可以避免污染。
刚学养细胞,先拿些细胞做预实验,主要是注意消化传代,还有换液。有人说养细胞很容易,但有人说养细胞太麻烦了。其实在实验室里有人形容养细胞就像养孩子,主要是细心。
建议去图书馆找些细胞培养技术的书看看。
检测细胞凋亡是一定要用对数期细胞吗?怎么判断细胞处于何期?谢谢
追答你可以看细胞的分裂是否遵循对数生长,也就是细胞死亡很少,并且不断一2的n次增殖,其实最主要是看你的培养基中是否有你培养细胞的次级代谢产物大量积累,对对数期是不会或很少有次产物的,并且对数期细胞很少调亡,很少或没有衰老细胞出现,没有畸形细胞出现。
判断对数期方法:
要知道细胞的对数生长期,测定细胞生长曲线即可:
法一:
在同一规格的培养瓶中,接种同等量的同一代细胞,经培养后每隔24小时取出几瓶细胞进行计数,以培养时间为横座标,不同时刻的细胞数的对数为底座标,标出各点并连成线,即为该细胞的生长曲线,可反应出细胞生长的动态。
法二:
用96孔/24孔细胞培养板,分7组,每组3孔,培养一周(7天),期间逐日检测一组,计数,最后把7天中的细胞数值绘成图,即为细胞生长曲线。
标准的细胞生长曲线类似微生物生长曲线,近似“S”形,一般在传代后第一天细胞数有所减少,经过一段时间的潜伏期,再进入对数生长期,达到平台期和生长稳定,最后衰老