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提的质粒电泳检测为什么都是小片段(100bp左右)?可是质粒上的抗性基因(AMP)能表达,不知道为什么 ?
提的质粒电泳检测为什么都是小片段(100bp左右)?可是质粒上的抗性基因(AMP)能表达,不知道为什么 ?
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其他回答
第1个回答 2011-10-18
可能质粒在培养板上是完整的。你提取质粒的时候动作粗暴导致质粒断裂。不然怎么会断裂呢,或者,难道你用的感受态细胞不是DH5α?比如用BL21提取质粒的时候,需要加入碱性磷酸酶抑制剂。
第2个回答 2011-10-08
你怎么确定是质粒上的amp能表达?只是因为在有amp的
培养基
中能够生长吗?这个是不能说明的.
你转化的
感受态细胞
是不是有问题?已经有抗性了?可以从公司买个新的感受态,再转化一次质粒.并且确定一下你的原始质粒没有问题.
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第3个回答 2011-10-08
你是如何确定抗性基因表达了呢?
第4个回答 2011-10-07
提质粒有问题呗。。。。
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提取DNA时,跑
电泳的
结果是条带主要集中在
100bp左右,
是不是产生降解了...
答:
一种可能是DNA降解形成的
小片段,
另一种可能是RNA没有去处干净形成的条带。
如果
质粒
dna双酶切
电泳
后,在胶上出现1)没有条带2)一条3)两条4)三条...
答:
结合上述答案提出自己的看法:1
质粒上
酶切位点太多导致质粒被降解为
小片段,电泳
时跑出去了或是太小难以从电泳图上显示出来。2质粒上只有一种酶的酶切位点或是其中一种或两种酶失活或两个酶的位点非常接近(<50
bp),电泳
看不出,但可以通过对照质粒做参考判断,对于上述的第一、三种情况应该比目的未...
为什么
荧光PCR产物
电泳检测
条带低于
100bp
答:
荧光定量PCR的产物一般都比较小,在一两百
bp左右,
你核对一下大小长度。做
电泳的
时候一定要小心,胶浓度最好配高一些。其实荧光定量PCR仪本来就自带
检测的
程序,那个程序挺靠谱的,用的时候勾一下。你那个那么亮的模糊的条带八成是引物二聚体了……
质粒
DNA
电泳
有何特点
?为什么?
答:
质粒
DNA电泳特点:DNA显色带条数:质粒DNA电泳有3条带;而基因组DNA应该只有一条带或者两条带。因为:基因组DNA电泳一般是1条带,虽然在你抽提过程中也会发生断裂,形成几十至几百kb的大片段。但是我们一般用1%的胶,无法区分不同大小的DNA,所以看起来像是一条带。如果配成0.6%的胶再加lamda ...
大
提质粒
之后
电泳
发现
小片段
很亮是怎么回事?
答:
通常是降解的RNA短
片段,
酚氯仿抽提以后乙醇沉淀再用含RNase的TE溶解是不能完全去除RNA的。通常的试剂盒过柱子能去除,如做转染还是用试剂盒吧。如果做克隆就没有必要了,你
的质粒
已经足够。
...2000多的目的
片段,电泳的
结果是只出现小于
100bp的
荧光条带,请教分析...
答:
1,看看你的引物有无问题,可先用outer和inner与别的后引扩一下,看能扩出来不;2,能扩出来证明引物没问题,再要看下你的RNA有无降解,可变性跑个电泳看下;3,如果以上都无问题,那看看试剂有没过期,操作对不对;如果还没出来,可加Q再详谈吧,以前就被这个折腾死了!希望能帮到你,实验顺利...
同样的菌液不同时间
提的质粒
跑
电泳
后带的大小不一样,是
为什么?
答:
1、2、3条带都是正常的,因为
质粒
有超螺旋、线性、开环三种状态,单酶切一下,再跑个
电泳,
只出现一个条带,且大小正确,那就确定无疑了
1.泳道
的质粒
DNA有几条带
?为什么?
答:
刚提出来的较纯
的质粒
应该只有一条带,很亮 过一段时间降解了之后,就有不同的带了,还拖尾的 酶切质粒的话也会出现不同的条带。如果质粒提取的不好,含基因组的话,那么最
上面的
那条带
是基因
组、下面的才是质粒
质粒
酶切后,目的片段DNA
是小片段,
琼脂糖
电泳
图目的条带太暗,怎么增加亮...
答:
你没怎么说清楚。首先,是大片段和
小片段(
目的条带)都暗,还是只有小片段暗?如果都很暗,可能是酶切体系中
的质粒
加的不够多,或者是你提取的质粒浓度不高。如果是只有小片段很暗,那就说明内切酶没把质粒切开,你要注意一下内切酶的活性或浓度、温度、离子等对酶活是否有影响。1、3ul的质粒感觉...
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