Km值指的是酶在达到最大反应速度一半时的底物浓度，Vmax指的是酶的最大反应速度。这两个值，Vmax是可以直接测出来的，Km值则需要计算。测Vmax时，首先设计含有不同浓度的底物的酶反应体系，然后测定这些反应体系中的产物生成速度。一般当底物浓度增加到某一值时，产物生成速度就不会再增加，这时的产物生成速度就是酶的最大反应速度Vmax。如果要求Km值，你需要按照米曼氏方程所提供的4种作图方式任意一种，作出曲线，然后通过计算求得Km值。举例来说，最简单的就是以产物生成速度作为纵坐标，以底物浓度作为横坐标，然后作出S曲线图，然后将这个
曲线拟合成方程（逻辑斯蒂方程），然后根据方程带入数值求出Km值。这个方法求方程比较麻烦，一般建议使用双倒数作图，也就是1/V为纵坐标，1/底物浓度为横坐标作图，此时的函数曲线是一条直线，而横轴的
截距就等于-1/Km。