为什么蛋白质在琼脂糖凝胶电泳中加loading buffer？

Question

如题所述

Answer 1

1、指示剂，方便观察电泳进行的程度；

2、密度大，携带你的样本沉到孔的底部；

3、保持蛋白线性及携带过量负电荷的状态。 

除此之外，里面最重要的是还有巯基乙醇还原剂来让蛋白质充分变性，同时保护-sh基团。

扩展资料

loading buffer的主要成分是SDS，甘油，溴酚蓝，TRIS，其中甘油的作用是使样品沉到点样孔中而不漂浮起来，SDS是结合蛋白质，使所有蛋白质所带电荷性质一样，但不同分子量的蛋白结合的SDS数量是不一样的。

溴酚蓝是指示剂，可以用来观察大概的电泳过程，因为它在不同浓度的胶中泳动的速率不一样，从而也可以看做是一个蛋白样品，这样就可以直观的大概了解蛋白泳动到了哪个位置，但是只能看一个大概。

loading buffer和煮沸有时候不一定能使蛋白完全变性成单体，比如一些膜受体蛋白，WB条带总是有二聚体和多聚体，可能是通过共价结合的，除非做去糖基化处理。