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DNA中混有RNA和蛋白质,请问怎么去除
如题所述
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推荐答案 2012-02-23
先用酚:氯仿:
异戊醇
(25:24:1)抽提,这时候经常在样品中会有酚残留,所以之后再用氯仿:异戊醇(24:1)抽提,将酚抽干净,以免影响后续的实验。在抽提前还要在DNA样品中加入1/10体积的PH5.2的3M
醋酸钠
,增加盐浓度,以免DNA沉淀出来的量太少,都被抽走了。还有最好在抽提之前要把DNA样品的体积扩大,这样也可以减少抽提过程中DNA样品的损失。
酚要用Tris-饱和酚,如果不要求样品很纯,就只用氯仿:异戊醇(24:1)抽提就可以了
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其他回答
第1个回答 2012-02-22
1,首先溶解样品
2,加氯仿,15000rpm 4度 15分钟离心
3,上层(水层RNA),中间层(半固体),下层(有机溶剂层DNA,加乙醇可沉淀出来)
第2个回答 2012-02-22
先用RNA酶 再用蛋白酶
相似回答
1.如果提取的
DNA中
含有
蛋白质
和
RNA
污染,应
如何
解决? 2.琼脂糖凝胶电泳...
答:
提取的时候饱和酚,氯仿需要定量,这些可以去蛋白
。去除RNA污染,RNA酶活性,定量。凝胶电泳,试剂最好是即用型的,因为有些东西放久了会长菌。然后是染料的热稳定性和灵敏度。。。
在提取基因组
DNA
的时候 还有哪些杂
质,如何除去
?
答:
蛋白质 用蛋白酶K消化蛋白质,SDS(20%)蛋白质变性
用氯仿抽提
后可以去除蛋白质 多糖类物质 用氯仿抽提可以去除
RNA 用RNA降解酶可以去除
如何去除DNA
样品中的
RNA
答:
1.DNA样品中加适量RNA酶(0.1~0.3ul) 37 ℃水浴保温30min
。2.DNA样品放一段时间,RNA自动降解因为RNA没有比DNA稳定。3.DNA溶于酚但是RNA不溶。如果你对这个答案有什么疑问,请追问,另外如果你觉得我的回答对你有所帮助,请千万别忘记采纳哟!
琼脂糖凝胶电泳时如果提取的
DNA中
含有
蛋白质
和
RNA
污染应
如何
解决...
答:
蛋白
污染可以考虑用酚氯仿多抽提几次,记得吸上清的时候小心点,宁可浪费也别吸到界面。一般后续还需要用氯仿/异戊醇抽提来
去除
酚。这样基本蛋白污染就可以去干净。实在不行,抽提一次后,就用蛋白酶K消化30min,再抽提。如果
DNA
多
,RNA
污染就添加RNase A消化,你可以中途取少量跑胶检测,RNA去干净了再...
如何去除DNA中
的
RNA
?
答:
DNA
提取过程
中,去除RNA
的常用方法是乙醇沉淀。因为RNA不溶于醇,乙醇能够
消除RNA
的水化层,使带负电荷的磷酸基团暴露出来。Na⁺之类的平衡离子能够与这些带电基团结合,在沉淀形成部位降低多核苷酸链之间的排斥作用。因此,只有在阳离子的量足以中和暴露的磷酸残基的电荷时才会发生乙醇沉淀。
如何
排除
DNA
溶液
中,RNA和蛋白质
的干扰
答:
3. 可选步骤:如样品中含有较多
蛋白质,
脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量
DNA
,上清中含有
RNA
。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应
去除
。取澄清的匀浆液进行下一步操作。4. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml...
DNA中去除蛋白质
的实验方式,求大家快点给我答案,小弟这里感激不尽_百度...
答:
盐析
,DNA和蛋白质
在盐溶液中的溶解度不一样
,还有蛋白
质和DNA都可以用电泳的方法进行分离纯化
怎样
将
dna中
的
RNA
祛除
答:
去除DNA中
的
RNA
应该用
RNa
seA(RNA水解酶A)以下资料来自百科:RNase A是一种被详细研究和具有广泛应用的核酸内切酶.RNase A 对
核糖核酸
有水解作用,但对脱氧核糖核酸则不起作用。核糖核酸酶A 在C端和U端残基处专一地催化RNA的核糖部分3'-与5' -磷酸二酯键的裂开,形成具有 2',3'-环磷酸衍生物寡...
怎样
将
dna中
的
RNA
祛除
答:
去除DNA中
的
RNA
应该用
RNa
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怎么在提RNA的时候去除DNA
提取RNA时DNA怎么去除
去除DNA中的RNA
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蛋白质和dna组成什么
DNA提好之后如何去除RNA
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