质粒纯化：超螺旋质粒DNA纯化方案

Question

如题所述

Answer 1

在生物医药行业蓬勃发展的背景下，质粒DNA的高纯度对细胞和基因治疗至关重要，尤其超螺旋质粒DNA由于其高效的转染和表达性能备受青睐。然而，提取过程中，如何有效去除杂质如宿主蛋白、RNA、内毒素等，是纯化工艺的关键。科诺赛生物提出了一套稳健且高效的超螺旋质粒DNA纯化三步法：

第一步，使用Chromrose 6FF凝胶过滤层析介质捕获质粒DNA并去除RNA，通过分子大小差异实现分离，上样量可达0.3CV，确保高回收率并减少RNA残留。
第二步，采用Plasmid Chromrose HP亲和层析介质，利用其特异性去除ocDNA，进一步提高scDNA纯度至90%以上。
最后，MoSphere 50M Q离子交换层析介质用于去除痕量杂质和内毒素，确保内毒素含量低至1.2EU/mg(scDNA)。

这套纯化方案通过细致的实验条件和层析介质的选择，确保了工艺的稳定性和高效性。科诺赛生物持续优化技术，以适应不同质粒序列和大小的需求，旨在帮助细胞与基因治疗领域的研究和生产过程。他们的三步法纯化技术，如Chromrose 6FF的高回收和去电荷特性，Plasmid Chromrose HP的嗜硫亲和特性，以及MoSphere 50M Q的耐碱性和高效分离，都展示了其在纯化方案中的实用价值。