转基因抗病香蕉的培育过程如图所示：图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶，质粒和抗病基因上的箭

Question

转基因抗病香蕉的培育过程如图所示：图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶，质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点．下表是四种限制酶的识别序列及酶切位点．限制酶PstⅠSmaⅠEooRⅠApaⅠ识别序列及酶切位点（1）若要获得抗病基因，能否用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割？______，说明由______．要获得含抗病基因的重组质粒能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割质粒？______．（2）卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长．欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，重组质粒中应同时含有______基因，作为标记基因．（3）②、③阶段是否可使用同种培养基？______；理由是______．（4）已知④阶段可以使用不添加任何植物激素的培养基即可生根，请根据所学知识给出理由：______．

Answer 1

（1）由抗病基因中酶切割位点可知，限制酶SmaⅠ的切割位点在抗病基因中间，对SmaⅠ位点进行切割破坏了抗病基因的结构，所以不能用限制酶SmaⅠ．根据重组质粒中目的基因的位置可知，切割质粒用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ进行切割．所以不能用PstⅠ、ApaⅠ限制酶．
（2）根据题意，培养基中有卡那霉素，所以培养的微生物中要含有抗卡那霉素基因作用为标记基因．
（3）在植物组织培养的不同阶段，培养基中激素种类、数量、比例不同，所以②③不能用同种培养基．
（4）④过程不需要添加植物激素，因为植物的芽能产生生长素，促进生根．
故答案为：
（1）不能   对SmaⅠ位点进行切割破坏了抗病基因的结构      不能
（2）抗卡那霉素
（3）不能       两阶段培养基中激素种类、数量、比例不同
（4）因为芽能产生生长素，促进根的生长