细胞冻存的问题

Question

我在4度放了半个小时之后，然后在-20度放了一个半小时，本来是要求半个小时的，结果忘了时间了，就在-20度放了一个半小时，然后又放在-70度的。请问我的细胞如果在复苏的话还能存活吗？？？
我们这实验室以前的步骤都要求缓慢冷冻，快速复苏。-4度半小时，-20度半小时，-80度过夜，然后液氮。所以这个步骤是没有错的。因为师兄师姐从来没有过差错。错就错在我在-20度放了放了一个半小时，不知道还能活不？？？？

Answer 1

会有一定的影响，但是影响不大，缓慢冻的过程就是逐渐使水凝华的过程，水由液态变为固态时体积会增大，这样对你冻的细胞就会产生一定的力，会对细胞有一定的影响，不过毕竟是细胞而不是蛋白质所以个人认为没太大的影响。

Answer 2

你的这个程序看起来不太对劲啊，细胞应该急冻于液氮，这样可以尽可能减少细胞内结晶冰的出现破坏结构。怎么放-20度？

我估计你细胞的存活率比较低。

Answer 3

冻存细胞，应用液氮急冻，避免缓慢降温形成晶体破坏细胞结构，你这个做法，很匪夷所思。

别等复苏了，现在赶紧拿出来活化，重新保存吧

对你的补充：我拿北京大学生命科学院国家重点实验室的名义打赌，你那些师兄师姐全是错的，正好弄反了。正确的步骤是速冻、慢融——液氮速冻，冰上解冻。
你们那做法，会有存活的细胞，但是一定比正确步骤少了很多，不信你试试。本回答被提问者和网友采纳