（1）制备或盛制培养基的器皿，不能使用铁锅和铜锅，以免铁锈或铜锈混入培养基中，使铁或铜过量，从而引起毒害作用。一般使用搪瓷缸或铝锅。
（2）制成的培养基，在使用前应做无菌检查，一般将其置在27℃左右恒温箱内培养24小时，证明无菌后方可使用。
（3）制备好的培养基，应及时用完，不宜久存，以免降低其营养价值或成分上发生变化。
（4）制备过程中，一定要严格遵守无菌操作规程，并标好标签，注明菌种名称（或编号）、接种日期和转管次数，尤其在同一时间接种几种不同的菌种时，要严防混杂。
（5）一级种转管的次数不能过多，一般以5～6次为好，不能超过10次，否则，由于移植时所造成的机械损伤，以及培养条件的变化，会削弱菌丝活力，导致遗传性状变异，降低出菇率。因此，引进或育成的菌种在第一次转管时，可较多数量扩转，并以不同方法保藏，按计划使用。
（6）切勿使用无标记或判断不准的菌种，以防误用后造成损失。
（7）不要使用培养基已干缩或老化的一级种，以免影响菌种成活率或导致生产性状退化。长期保藏的菌种，用前应放在恒温箱中活化培养，并逐步提高培养温度，活化培养时间一般为1～3天。如在冰箱中保存时间超过3个月，最好转管培养一次再用，以提高接种成功率和萌发速度。
（8）启用保藏的一级种，应认真检查是否有污染现象。如斜面上呈现明显的黑色、绿色、黄色等菌落，则说明已遭霉菌污染。将斜面放在向光处，从培养基背面观察，如果在气生菌丝下面有黄褐色圆点或不规则斑块，说明已遭细菌污染。被污染的菌种绝不能用于扩大生产。
（9）接种块不萌发或不吃料的原因：菌种在0℃甚至以下保藏，菌丝已冻死或失去活力；菌龄过老，生活力衰弱；接种操作时，母种块被接种铲、酒精灯火焰烫死；母种块没有贴紧原种培养基，菌丝萌发后缺乏营养死亡；接种块太薄太小干燥而死；母种培养基过干，菌丝无法活化，或原种培养料偏干，菌丝无法吃料生长；培养料配比不当，或瓶（袋）内有氨气及其他不良气体，或酸碱度不宜；菌袋接种前冷却不彻底，或培养温度过高等。