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dh10b是感受态细胞还是细菌
如题所述
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推荐答案 2017-04-19
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培养
dh10感受态细胞
为什么要用soc培养基而不用lb培养基
答:
LB 用于一般的用途,扩增
细菌
。Super Optimal Broth (SOB medium) 强化了营养物质,用于在转染后增加转染效率。Super Optimal broth with Catabolite repression (SOC)。是SOB加入葡萄糖以抑制分解代谢,增加生长速度。
酵母双杂交文库构建和筛选-宝吉生物
答:
比如DH10B 电转化感受态细胞
,这个感受态细胞转化效率比国产的高出100倍以上。这个感受态细胞需要具有很多的海关批文才能买到,其他公司由于没有相关资质,是无法进口的。 3) All-Direct专利方法,这个是我们的独家专利方法,是在invitrogen方法上做了重要改进,保留了其优点(不用PCR扩增,文库保真度高),去除了其需要经过两次...
几种
感受态细胞
的用途,基因型和特点
答:
1、
DH
5菌株 用途:克隆菌,用于分子克隆、质粒提取。基因型:supE44△lacU169(?80lacZ△M15)hsdR17 recAl endAl gyrA19 thi-1 relAl 特点:一种用于铺制与培养质粒平板和粘性平板的抑制型菌株.其?80lacZ△M15基因的产物可与pUC载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补,可用于蓝白斑筛选。recAl和e...
感受态细胞
的制备
答:
感受态细胞
的制备如下:1、从37℃培养过夜的新鲜平板中挑
DH
5α单菌落,接种到5mLLB培养基中,37℃下270r/min震荡培养过夜;2、取2mL过夜培养菌液注入到100mLLB培养基中,37℃下激烈震荡培养至A600=0.4~0.6(约2h);3、将培养液转移到灭菌过的50mL离心管中,在冰上放置
10
min;4℃下4000r/min...
常用
感受态细胞
制备方法有哪些?
答:
用CaCl2制备新鲜或冷冻的大肠杆菌
感受态细胞
,常用于成批制备
感受态细菌
。本法适用于大多数大肠杆菌菌株,且迅速、重复性好。操作过程简述如下。1.从37℃培养16~20h的新鲜平板中挑取一个单菌落(如大肠杆菌
DH
52),或1ml新鲜的16~20h过夜培养物,转到一个含有100mlLB培养基的1L或500ml烧瓶中。于37℃...
转化实验中除了用大肠杆菌的
感受态细胞还
可以用哪种菌的感受态细胞?
答:
要看你做的是什么了。大肠杆菌
感受态
根据用处的不同,也有很多种类,比如比较常见的TOP
10
、
DH
5α,质粒保存较为稳定的JM109、STBL3,表达所用的BL21等等。除此之外,植物基因转化常用土壤农杆菌。还有,你要在乳酸菌中表达蛋白或基因操作,就要用乳酸菌的感受态,你要在伤寒杆菌里操作,就要做伤寒杆菌的...
2020-08-24质粒构建
答:
常用的
感受态细胞
有
DH
5α、BL21(DE3)、Rossetta等,而抽提质粒一般用DH5α,可以自己制备也可以购买商业化的感受态。 ABOUT Transformation 注意事项 1. 感受态细胞要现用现融,刚刚融化的感受态转化效率最高; 2. 避免反复冻融感受态细胞; 3. 整个操作过程要轻柔,不要用移液器猛烈吹吸; 4. 感受态和连接产物(或...
dh
5α
感受态细胞
不表达自身的质粒吗?扩增质粒后提取质粒的时候会不会...
答:
你好!
dh
5α
感受态细胞是
常用的
细菌
质粒扩增提取细菌,其本身是含有质粒的。普通的大肠杆菌细胞内有一种“免疫”机制,即当外源DNA 侵入时,会产生酶类将外源DNA切除,无法进行复制增殖。而其自身质粒的基因组被修饰(如甲基化)所以不被限制酶识别,不会被剪切。
DH
5α菌株是一种经诱变的菌株,其基本...
dh
5α
感受态细胞
的菌落是什么样的?
答:
DH
5α倒是长成这个样子没错。但是氨苄抗性一般16个小时就应该有菌落形成了。你挑几个菌落做一下验证吧。可能是培养条件有点问题,或者质粒本身问题,或者抗生素加多了,都有可能长菌落长得慢了。
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