甘油保藏法缺点

如题所述

甘油保藏法缺点是需购置超低温液氮设备,且液氮消耗量大,费用较高。

优点是操作简单、高效、保藏期一般可达15年以上,各种形式的微生物都可用此种方式保藏,也是目前公认的最有效的菌种长期保藏的技术之一。

甘油冷冻保藏管制法简单,但是在制作过程中,应注意使用纯菌悬液不是含有培养基的增菌液,避免在冷冻保藏中保藏管中营养物质,干扰菌种的保藏。

操作方法:

(1)用火焰灭菌的接种环取斜面菌种在平皿上划线分离单菌落。

(2)平皿倒置于30℃或37℃恒温培养箱,培养24-48小时,至单菌落的大小为3mm左右。

(3)挑取一个单菌落,接种于一个装50mL的300mL三角瓶中30℃或37℃振荡培养10-15小时,至菌密度OD600为1.0-1.5。

(4)用火焰灭菌的接种环取少量种子液,涂片后,作革兰氏染色,在显微镜下观察菌体的形态,及是否有杂菌。

(5)按30%甘油:种子液为1:1(V/V)的量加入无菌甘油, 混合后分装至事先灭菌的菌种保存管(1-2mL/管),-70℃或液氮保存。

以上内容参考 百度百科-菌种保藏

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