求助:ELISA的标准曲线究竟怎么作

如题所述

第1个回答  2024-12-11
在进行ELISA实验之后,我们会得到酶标仪检测得到的标准品和样本的OD值。标准品的浓度已知,我们可以通过这些数据建立一条标准曲线,公式为Y=aX+b,其中Y代表浓度,X代表OD值。

具体操作如下:首先,将OD值和浓度值输入Excel,然后选择数据区域,点击图表向导,选择XY散点图,不选择带连线的散点图。接下来,点击下一步,如果数据是横向列表的,则保持默认,如果是纵向列表的,则选择“列”。通过选择“系列”,我们可以在需要时更改X值和Y值。

为了将纵坐标和横坐标调换,我们只需点击X值和Y值文本框右边的小图标。接下来,选择正确的数据区域以调整坐标轴。完成这些步骤后,我们将得到一张标准值的完整散点图。

接下来,我们需要添加趋势线,以创建标准曲线。在散点图上点击标准值点,然后右键点击选择“添加趋势线”。根据趋势线类型选择对话框中的选项,如果点能形成直线或接近直线,则选择“线性”;否则选择“多项式”,并设置阶数为2,得到y=ax2+bx+c的方程。

接下来,点击趋势线,右键点击选择“趋势线格式”,然后选择“选项”选项卡,点击显示公式和显示R方。公式和相关系数R方值将会显示在图表上。

最后,将样本的OD值作为X值代入上述方程,即可计算出样本浓度值。通常情况下,ELISA的标准曲线的相关系数应达到0.99以上,本例中的值为0.9999,表明曲线的可信度非常高。
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