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我们用Trizol法提取组织总RNA,仪器测得提取浓度在1000ng/uL 这个数值是不是正常呢 如果不正常 原因在哪里
如题所述
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推荐答案 2011-01-18
浓度正常,浓度主要看你加多少Rnase-free的水溶解的,提取RNA的质量主要还是要通过260/280的比值看是不是在2.0左右,还要跑胶看看28s,18s,5s的三条带是不是清晰,一般质量好的RNA,28s:18s的亮度比例在2:1左右,最后一条5s的应该比较淡
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trizol提取
烟草
组织
100mg叶片
总RNA,
最终
浓度
大概多少???30
ul
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我做过
Trizol法提取RNA
实验,在这方面之前也有困惑,不过查了很多资料后才知道:
Trizol提取
的RNA用DEPC处理的水溶解的话,A280/A260比值为1.4、1.5左右比较正常,若用TE溶解的话,其比值≥1.8。不知道你的OD260/OD280较低
,是不是
因为溶解RNA的溶液用的是水。若是,没关系,继续往下做,会有结果...
TRIzol法提取
动物
组织总RNA,
A260/280>2是为什么?
答:
2.0到2.1都是正常的数值。也有说法说生物越高等
,这个
比值也相应会大一些,再大那就是有
RNA
降解了,导致A260升高。你可以看看《RNA分离与鉴定试验指南——RNA研究方法》。这本书对于RNA质量评价有比较详细的叙述,紫外吸收是其中的第二部分。
RNA
的
提取
方法步骤及原理.
答:
Trizol是一种
总RNA
抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速裂解细胞,抑制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用
Trizol法
进行
提取组织
或细胞中的RNA。Trizol作用原理:在匀质化或溶解样品中,Trizol试剂可保持RNA的完整性,同时能破坏细胞及溶解细胞成分。加入氯仿离心后,裂解液分层成水相和有机相。RNA存在于水相...
在
提取
土豆多酚氧化酶时,加入不溶性聚乙烯吡咯烷酮和tween-80各有何作 ...
答:
&P3[7m*^$U$_"?:F"xu*N(?(I氯化锂
法提取总RNA
:"u;}'I!r'^'^&l本方法用高浓度尿素变性蛋白并抑制RNA酶,用氯化锂选择沉淀RNA,其特别适合于从大量样品中提取少量
组织RNA,
具有快速简洁的长处,但也存在少量DNA的污染及
RNA得
率不高,小RNA片断丢失的缺陷。#~*S:}9`*r4Z3P试验试剂:"d$r6Q+_.I8Q1...
RNA提取
过程中的关键步骤及注意事项有哪些?
答:
试剂:提取缓冲液,KAc(5M),异丙醇,无水乙醇,DEPC水 仪器:离心机,恒温水浴锅,研钵 方法一 动物、植物(嫩叶)的
总RNA
分离 大约2克植物组织或动物组织用液氮研磨 ↓ 加5ml
Trizol
裂解液 ↓ 12000rpm ,4度,10分钟 ↓ 加入1ml氯仿 ↓ 剧烈振荡15秒,室温温育2-3分钟 ↓ 室温离心10分钟,8000rpm ↓ ...
请问
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蛋白质除不尽的原因及解决办法?
答:
吸上清400uL足矣,不要贪多,呵呵,这是我刚开始犯的错误
RT-PCR实验操作的注意事项
答:
要表达真核生物的基因并表达出相应的蛋白,只能通过提取其mRNA并RT-PCR这条颇费周折的途径。1.RNA的
提取RNA
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RNA,
再经过沉淀,洗涤,晾干,最后溶解。但是由于RNA酶无处不在,随时可能将RNA降解,所以实验中有很多地方需要注意,稍有疏忽就会前...
我想问做PCR扩增应该注意的事项?
答:
下面
,我们
介绍一个可以确认
RNA
溶液中有没有残留的RNA酶的方法。3)保温试验方法很简单的,按照样品
浓度,
从RNA溶液中吸取两份
1000 ng
的RNA加入至0.5 ml的离心管中,并且用pH7.0的Tris缓冲液补充到10 ul的总体积,然后密闭管盖。把其中一份放入70℃的恒温水浴中,保温1 h。另一份放置在-20℃冰箱中保存1 h。时间...
甲基化检测的送样要求
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,浓度
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