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我是WB新手。目的分子量180.应该用什么内参,分离胶的浓度选多少?请高手指教
如题所述
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推荐答案 2020-06-10
分子量180,有点大啊,可以试试6%分离胶
内参我们用的是GAPDH,你可以参考
温馨提示:答案为网友推荐,仅供参考
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http://99.wendadaohang.com/zd/vBWXztBOt.html
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...蛋白的
分子量
大约
是180,
SDS-PAGE电泳
分离胶的浓度
配制
多少
才合适呢...
答:
8% 胆子大就配7
western-blot中
分离胶的浓度
怎么选择
答:
不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样,
比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白,而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白
。而因为western blot的膜应该是完全覆盖SDS PAGE的凝胶,所以不用太担心条带在凝胶上位置偏上活偏下。所以western blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量。...
western-blot中
分离胶的浓度
怎么选择
答:
溴酚蓝跑到胶的底部为准,26kD在10%的由下往上1/4的地方,而15%就在由下往上大约1/2(不太确定)的地方,对于
分子量
比较小的蛋白,
胶的浓度
越大
,分离
效果越好。但是必须考虑到,胶的孔径一旦小于蛋白-SDS复合体的直径,分子量大于这个蛋白的所有蛋白仍然不能有好的分离效果。如果孔径太大,所有...
wb胶的浓度
答:
有的时候蛋白跑不出来,其实未必是
分离胶浓度选
的不好,也有可能是marker的问题。marker起到的是蛋白
分子量
指示剂作用,但是要根据蛋白分子量选择合适的marker。一般的marker分子量范围在10-130kDa之间,都可以满足正常蛋白的需要。但有些分子量范围较广的marker,比如说6-250kDa,虽然说它范围很广,可...
我的蛋白
分子量
150-160kd的
,我应该用多少的分离胶
呀?我查的最佳是6%...
答:
如果
胶浓度
够大,蛋白条带会比较细一些,但电泳速度比较慢,大的片段可能分不开。10%能不能用得看你的情况了。如果只是一个条带,用10%是没有问题的。如果有些杂带,而且杂带与你的目标蛋白差得比较远,也是可以用的。如果差别小,那就得
用浓度
低一点的胶了,这样才能分开。
我的蛋白
分子量
150-160kd的
,我应该用多少的分离胶
答:
根据一般的建议,蛋白
分子量
150-160kd的
应该选择
丙烯酰胺浓度5%左右的
分离胶,
此时
胶浓度
较稀易碎,需要小心操作。
我的蛋白
分子量
150-160kd的
,我应该用多少的分离胶
答:
15%的
胶应该
是没问题的,跑的时间长一些,距离长一些就能跑开。上样量得看你蛋白的表达量,一般15-30μg就应该没有问题,不过选用β-actin做对照,建议用另一块12%的胶跑β-actin,这样可以使目的蛋白和对照条带宽度大概一致。
...跑胶时,用多大
浓度的胶,
蛋白每孔上样
量是多少?
答:
胶浓度
越大,跑的蛋白
分子量
越小,你可以选择6%的,不过那样的话你就要跑就点,一般恒压140V跑。而且你的蛋白很浅应该不一定是跟胶有关,很多因素啊。也许你的抗体不是很好用(很细我不知道你什么意思,一般都是呈带状),或者你上的蛋白太少了,一般
我都是
30~50ug,就差不多了。我看过了 你...
分离分子量
72和38用何种
浓度分离胶
答:
分离分子量72和38
用分离胶
分别是10%,40%。
分离胶浓度的
选择取决于目的蛋白
分子量,
不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白
分子量的
分辨率不一样。分离胶指不连续缓冲体系聚丙烯酰胺凝胶电泳中的一部分,其组成、缓冲液pH和凝胶孔径与浓缩胶均不同,具有分子筛效应的小孔径凝胶。蛋白质或核酸在电泳过程中由...
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