肠道致病菌在EMB和SS培养基上为什么是无色半透明的菌落呢？具体机制？不发酵乳糖。染料进不到菌体里面吗

Question

如题所述

Answer 1

SS平板的原理:SS为强选择性培养基.其成分除了有必要的胨、牛肉膏等氮、碳源外，其他则为选择性抑制剂和缓冲剂。如柠檬酸钠、胆盐、硫代硫酸钠的协同作用及煌绿共同来抑制肠道非病原性细菌及部分大肠杆菌的生长。对志贺菌属及沙门 菌属相对抑制性较弱。硫代硫酸钠有助于大肠菌的着色，柠檬酸铁能缓解某些药物对病原菌的毒副作用，同时与细菌产物起反应呈黑色菌落。中性红指示剂可把分解乳糖和不分解乳糖的细菌鉴别开，前者为红色菌落，后者为无色菌落。

EMB其实主要不是用来鉴别致病菌的，而是用来鉴别大肠菌群的(是一类菌)，若乳糖被分解，菌落成深紫色；若不被分解，则成浅粉色或琥珀色。

其实出现颜色的物质就是ph值指示剂，颜色的变化其实是发酵乳糖后产酸，Ph值变化，于是显红色，外加胆盐部分被氧化后沉淀造成。追问

EMB培养基中，若该肠道菌不分解乳糖，菌落是无色半透明的。培养基中的染料为什么不能使菌落着色呢？伊红是酸性染料，美兰是碱性染料。为什么美兰不能使菌落着色呢？

追答

伊红Y是一种酸性染料,有色部分为阴离子(E-)
美蓝是一种碱性染料,有色部分是阳离子(M+)

细菌细胞的主要成分是蛋白质,由于蛋白质系两性电解质,在偏酸性环境中正电荷增多,易与伊红结合,在碱性环境中负电荷增多,易与美蓝结合.
而细菌发酵乳糖是产酸的.

美蓝并不是完全不起作用，只是多见于典型的大肠杆菌起的作用比较明显(乳糖发酵很迅速),在伊红染成粉红色之后,美蓝可以继续将其染成紫黑色带金属光泽的菌落.如果美蓝染上的量比较小，那么就观察不出，这时候菌落就是粉红色的,见于乳糖发酵慢一些的菌落,这些是由细菌的特性决定的.

追问

在EMB上，带颜色的菌落比如大肠杆菌的原理我知道了。我想知道的是一些不发酵乳糖的肠道致病菌无色半透明菌落比如伤寒杆菌形成的原理是什么呢？这些菌落（碱性环境）不能被比如美兰着色吗？

追答

虽然描述是这样,但其实并非完全无色,见过之后就会发现其实还是略带一点颜色的.即使在中性环境中依然会导致染色,不过这样的染色只有在显微镜下勉强看得出一点,肉眼看不出的.

几乎不可能是碱性环境的,成品ph值是7.1,而即使细菌完全不发酵乳糖，那么它依然可以分解蛋白胨,产生的多数都是一些酸性物质.产碱的细菌我偶然遇到个别，但是从没观察过它们在EMB上长什么样.有时候把TSI或KIA不变黄的部分说成是产碱,这只是相对产酸的部分,其实并没有产碱.