æ¿å
æ«æå
±èç¦æ¾å¾®éï¼Confocal laser scanning microscopeï¼CLSM)æ¯è¿ä»£æå
è¿çç»èçç©å»å¦åæ仪å¨ä¹ä¸ãç®åï¼æ¿å
æ«æå
±èç¦æ¾å¾®ææ¯å·²ç¨äºç»èå½¢æå®ä½ãç«ä½ç»æéç»ãå¨æååè¿ç¨çç 究ï¼å¹¶æä¾å®éè§å
æµå®ãå®éå¾ååæçå®ç¨ç 究æ段ï¼ç»åå
¶ä»ç¸å
³çç©ææ¯ï¼å¨å½¢æå¦ãççå¦ãå
ç«å¦ãéä¼ å¦çååç»èçç©å¦é¢åå¾å°å¹¿æ³åºç¨ã
1. ç»ç»åç»èä¸çå®éè§å
æµå®
æ¿å
æ«æå
±èç¦æ¾å¾®éå¯ä»¥ä»åºå®åè§å
æè²çæ æ¬ä»¥åæ³¢é¿ãåæ³¢é¿æå¤æ³¢é¿æ¨¡å¼ï¼å¯¹åæ è®°æå¤æ è®°çç»èåç»ç»æ æ¬çå
±èç¦è§å
è¿è¡æ°æ®ééåå®éåæ,åæ¶è¿å¯ä»¥å©ç¨æ²¿çºµè½´ä¸ç§»å¨æ æ¬è¿è¡å¤ä¸ªå
å¦åççå å ï¼ å½¢æç»ç»æç»èä¸è§å
æ è®°ç»æçæ»ä½å¾å,以æ¾ç¤ºè§å
å¨å½¢æç»æä¸ç精确å®ä½ã 常ç¨äºåä½ååæ交ãè¿ç¤ç»èå亡è§å¯ãå个活ç»èæ°´å¹³ç DNA æ伤åä¿®å¤çå®éåæã
2. ç»èé´é讯çç 究
å¨ç©åæ¤ç©ç»èä¸ç¼éè¿æ¥ä»å¯¼çèé´éä¿¡å¨ç»èå¢æ®åååä¸èµ·çéè¦ä½ç¨ã æ¿å
æ«æå
±èç¦æ¾å¾®éå¯éè¿è§å¯ç»èç¼éè¿æ¥ååç转移æ¥æµéä¼ éç»èè°æ§ä¿¡æ¯çä¸äºç¦»åãå°ååç©è´¨ã 该ææ¯å¯ä»¥ç¨äºç 究èèåçãçæ®åè²ãç¥ç»çç©å¦ãè¿ç¤åççè¿ç¨ä¸ç¼éè¿æ¥é讯çåºæ¬æºå¶åä½ç¨ï¼ä¹å¯ç¨äºé´å«å¯¹ç¼éè¿æ¥ä½ç¨ææ½å¨æ¯æ§çåå¦ç©è´¨ã
3. ç»èç©çåå¦æµå®
æ¿å
æ«æå
±èç¦æ¾å¾®éå¯å¯¹ç»èå½¢ç¶ãå¨é¿ãé¢ç§¯ãå¹³åè§å
强度åç»èå
é¢ç²æ°çåæ°è¿è¡èªå¨æµå®ã è½å¯¹ç»èç溶é
¶ä½ã线ç²ä½ãå
è´¨ç½ãç»è骨æ¶ãç»ææ§èç½è´¨ãDNAãRNAãé
¶ååä½ååçç»èå
ç¹å¼ç»æçå«éãç»åååå¸è¿è¡å®éãå®æ§ãå®æ¶åå®ä½æµå®ã
4. ç»èå
é离åå pH å¼å¨æåæ
æ¿å
æ«æå
±èç¦æ¾å¾®éææ¯æ¯æµéè¥å¹²ç§ç¦»åæµåº¦å¹¶æ¾ç¤ºå
¶åå¸çææå·¥å
·ï¼å¯¹ç¦ç¹ä¿¡æ¯çææ辨å«ä½¿å¨äºç»èæ°´å¹³æ¾ç¤ºç¦»ååå¸æ为å¯è½ã å©ç¨è§å
æ¢éï¼æ¿å
æ«æå
±èç¦æ¾å¾®éå¯ä»¥æµéå个ç»èå
pH åå¤ç§ç¦»å(Ca2+ãK+ãNa+ãMg2+)å¨æ´»ç»èå
çæµåº¦åååã ä¸è¬æ¥è¯´ï¼çµççè®°å½è£
ç½®å æåææ¯æ£æµç»èå
离åéååçé度ç¸å¯¹è¾å¿«,ä½å
¶å¾åæ¬èº«çä»·å¼è¾ä½,èæ¿å
æ«æå
±èç¦æ¾å¾®éå¯ä»¥æä¾æ´å¥½çäºç»èç»æä¸é离åæµåº¦å¨æååçå¾å,è¿å¯¹äºç 究éç离åç»èå
å¨åå¦ææä¹ã
4. ä¸ç»´å¾åçé建
ä¼ ç»çæ¾å¾®éåªè½å½¢æäºç»´å¾åï¼æ¿å
æ«æå
±èç¦æ¾å¾®ééè¿å¯¹åä¸æ ·åä¸åå±é¢çå®æ¶æ«ææåï¼è¿è¡å¾åå å å¯æææ ·åçä¸ç»´ç»æå¾åã å®çä¼ç¹æ¯å¯ä»¥å¯¹æ ·åçç«ä½ç»æåæï¼è½ååçµæ´»ãç´è§å°è¿è¡å½¢æå¦è§å¯,并æ示äºç»èç»æç空é´å
³ç³»ã
5. è§å
æ¼ç½æ¢å¤ææ¯
该æ¹æ³çåçæ¯ä¸ä¸ªç»èå
çè§å
åå被æ¿å
æ¼ç½ææ·¬çï¼å¤±å»åå
è½åï¼èé»è¿æªè¢«æ¼ç½ç»èä¸çè§å
ååå¯éè¿ç¼éè¿æ¥æ©æ£å°å·²è¢«æ¼ç½çç»èä¸ï¼è§å
å¯éæ¸æ¢å¤ã å¯éè¿è§å¯å·²åçè§å
æ¼ç½ç»èå
¶è§å
æ¢å¤è¿ç¨çååéæ¥åæç»èå
èç½è´¨è¿è¾ãåä½å¨ç»èèä¸çæµå¨å大ååç»è£
çç»èçç©å¦è¿ç¨ã
6. é¿æ¶ç¨è§å¯ç»èè¿ç§»åçé¿
æ´»ç»èè§å¯é常éè¦ä¸å®çå çè£
ç½®åç注室ï¼ä»¥ä¿æå¹å
»æ¶²çéå®æ¸©åº¦å CO2 æµåº¦çæå®ã ç®åçæ¿å
æ«æå
±èç¦æ¾å¾®éï¼å
¶å
å产çæç已大大æ¹åï¼ä¸æ´äº®çç©éåæ´å°å
æ¯æ§çææç»ååå¯ä»¥åå°æ¯æ¬¡æ«ææ¶æ¿å
æ对ç»èçæ伤,ç¨äºæ°å°æ¶çé¿æ¶ç¨å®æ¶æ«æ,è®°å½ç»èè¿ç§»åçé¿çç»èçç©å¦ç°è±¡ã
7. å¨ç»èåååçç©å¦åºç¡ç 究ä¸çåºç¨
æ¿å
æ«æå
±èç¦æ¾å¾®éåºç¨ç
§æéä¸æ£æµåå
±è½æåï¼æææå¶äºç¦å¤æ¨¡ç³æå并å¯å¯¹æ æ¬åå±åå«æåï¼å¯¹æ´»ç»èè¡æ æ伤çâå
å¦åçâè¿ç§åè½ä¹è¢«å½¢è±¡ç称为âæ¾å¾® CTâãCLSM è¿å¯ä»¥å¯¹è´´å£çå个ç»èæç»è群çèå
ãèå¤è§å
ä½å®ä½ãå®æ§ãå®éåå®æ¶åæï¼å¹¶å¯¹èå
æåå¦çº¿ç²ä½ãå
è´¨ç½ãé«å°åºä½ãDNAãRNAãCa2+ãMg2+ãNa+ ççåå¸ãå«éçè¿è¡æµå®åå¨æè§å¯ï¼ä½¿ç»èç»æååè½æ¹é¢çç 究达å°ååæ°´å¹³ã
8. å¨è¿ç¤åæçè¯ç©çéç 究ä¸çåºç¨
æ®éæ¾å¾®éåçµåæ¾å¾®éï¼ä»
è½å¯¹è¿ç¤ç¸å
³æåè¿è¡å®æ§åæï¼è CLSM åå¯å¯¹åæ è®°æè
å¤æ è®°ç»èãç»ç»æ æ¬åæ´»ç»èè¿è¡éå¤æ§æä½³çè§å
å®éåæï¼ä»è对è¿ç¤ç»èçæå表达ãç»èç»æç¹å¾ï¼æè¿ç¤è¯ç©çä½ç¨åæºå¶çæ¹é¢å®éåã
9. å¨è¡æ¶²ç
å¦åå»å¦å
ç«å¦ç 究ä¸çåºç¨
æ¿å
æ«æå
±èç¦æ¾å¾®éè§å¯å
ç«ç»èåç³»ç»ï¼å¦æ çªç¶ç»èãåæ ¸-åå¬ç»èç³»ç»ãèªç¶æ伤ç»èãæ·å·´ç»èæ¶ï¼å¨åç¡®ç»èå®ä½çåæ¶ææé´å®å
ç«ç»èçæ§è´¨ã
10. å¨å¤§èåç¥ç»ç§å¦ä¸çåºç¨
æ¿å
æ«æå
±èç¦æ¾å¾®éåå±æ«æåç°ç¥ç»è½´çªçå
é¨ç»æè¿ç»æ§å¥½ãç¨æ¿å
æ«æå
±èç¦æ¾å¾®éè½è§å¯å°èå¹²ç»ç»ä¸ç¥ç»è½´çªçæ£å¸¸èµ°åï¼å¯æé¤å¨è§å
æ¾å¾®éä¸ç±æ¤é æçä¸äºç
çå象ã并ä¸æ¿å
æ«æå
±èç¦æ¾å¾®éè½è§å¯ç¥ç»è½´çªçä¸ç»´ç»æï¼å æ¤åºç¨ CLSM æå¯è½è§å¯å°æ®éå
éä¸æªè½åç°çç¥ç»ç»ç»çç»å¾®ç
åã
11. å¨ç¼ç§ç 究ä¸çåºç¨
å©ç¨æ¿å
æ«æå
±èç¦æ¾å¾®éå¯ä»¥è§å¯æ¶ç¶ä½ï¼è§èãè§ç½èãè¹èåç«ç¶ä½çç»æåç
çååã
12. å¨éª¨ç§ç 究é¢åä¸çåºç¨
æ¿å
æ«æå
±èç¦æ¾å¾®éå¨éª¨ç§ç 究é¢åçåºç¨ç°ç¶è¡¨æï¼CLSMå¨è§æµéª¨ç»èå½¢æå¦ç 究ã骨ç»èç¹å¼æ§èç½ï¼éª¨éç´ ï¼ä»¥å骨ç»èä¹é´çç¸äºä½ç¨å
·ææ¾èçä¼å¿ã
温馨提示:答案为网友推荐,仅供参考