简单的说,一把米尺,最小刻度是毫米,那么测定范围就是0到1米,灵敏度就是1毫米
另外关于蛋白质含量的测定:
蛋白质含量测定法,是生物化学研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四种古老的经典方法,即定氮法,双缩尿法(Biuret法)、Folin-酚试剂法(Lowry法)和紫外吸收法。另外还有一种近十年才普遍使用起来的新的测定法,即考马斯亮蓝法(Bradford法)。其中Bradford法和Lowry法灵敏度最高,比紫外吸收法灵敏10~20倍,比Biuret法灵敏100倍以上。定氮法虽然比较复杂,但较准确,往往以定氮法测定的蛋白质作为其他方法的标准蛋白质。
五种蛋白质测定方法比较如下:
方法 灵敏度 时间 原理 干扰物质 说明 凯氏定氮法
(Kjedahl法) 灵敏度低,适用于0.2~ 1.0mg氮,误差为 ±2% 费时
8~10小时 将蛋白氮转化为氨,用酸吸收后滴定 非蛋白氮(可用三氯乙酸沉淀蛋白质而分离) 用于标准蛋白质含量的准确测定;干扰少;费时太长 双缩脲法(Biuret法) 灵敏度低
1~20mg 中速
20~30分钟 多肽键+碱性Cu2+®紫色络合物 硫酸铵;
Tris缓冲液;
某些氨基酸 用于快速测定,但不太灵敏;不同蛋白质显色相似 紫外吸收法 较为灵敏
50~100mg 快速
5~10分钟 蛋白质中的酪氨酸和色氨酸残基在280nm处的光吸收 各种嘌吟和嘧啶;
各种核苷酸 用于层析柱流出液的检测;核酸的吸收可以校正 Folin-酚试剂法(Lowry法) 灵敏度高
~5mg 慢速
40~60
分钟 双缩脲反应;磷钼酸-磷钨酸试剂被Tyr和Phe还原 硫酸铵;
Tris缓冲液;
甘氨酸;
各种硫醇 耗费时间长;操作要严格计时;
颜色深浅随不同蛋白质变化 考马斯亮蓝法(Bradford法) 灵敏度最高
1~5mg 快速
5~15分钟 考马斯亮蓝染料与蛋白质结合时,其lmax由465nm变为595nm 强碱性缓冲液;
TritonX-100;
SDS 最好的方法;
干扰物质少;
参考资料:http://bbs.foodmate.net/thread-218303-1-1.html