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western 想分开65和93kd的蛋白用多大浓度的分离胶
如题所述
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推荐答案 2014-01-20
8%的胶就可以了,浓度越高的胶越能分小分子量的蛋白。65和93kD算是比较大的了,用8%的胶就可以分开。
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第1个回答 2014-01-27
主要看你用什么方法转膜,如果用湿转的话,胶浓度高点也没有问题,12%的分离的效果会很好的。但是如果要用半干转,还要保证90多k的蛋白的转印效率的话,建议适当调低分离胶的浓度,这样可以保证大蛋白出胶,达到和分子量稍小蛋白差不多的转印效率。
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western
想分开65和93kd的蛋白用多大浓度的分离胶
答:
8%的胶就可以了
,浓度越高的胶越能分小分子量的蛋白。65和93kD算是比较大的了,用8%的胶就可以分开。仅代表个人观点,不喜勿喷,谢谢。
Western
blot
分离胶浓度的
选择?
答:
所以不用太担心条带在凝胶上位置偏上活偏下 所以
western
blot中
分离胶浓度的
选择取决于目的蛋白分子量 如果以溴酚蓝跑到胶的底部为准,26
kD
在10%的由下往上1/4的地方,而15%就在由下往上大约1/2(不太确定)的地方,对于分子量比较小
的蛋白
,当然是胶的浓度越大,分离效果越好.但是你必须考虑到,胶...
...还有90几
KD的
,该
用多大浓度的分离胶
呢?谢谢各位啦
答:
6%-10%
,浓度太低了胶会很容易破的,建议用8%比较好。 7.5%不好计算,呵呵。 注意选择好合适的marker哦。
要分离
77KD和80
KD的
两个
蛋白
,要
用多大浓度的
SDS-PAGE胶能有较好的分辨率...
答:
一般凝胶浓度低是容易出现条带模糊的情况。个人手法是:用好点的材料制备凝胶来进行分析。
10%的浓度可以用来分离这两种蛋白
,将电泳电压在后半程调高可改善条带清晰度。也可以调高分离胶浓度至12%,但差别会较10%的更小。是在不行可以考虑用梯度胶分。补充回答:“用好点的材料”是说的丙烯酰胺和甲...
最近
要
做
Western
Blot,
蛋白
分子量分别是225
KD
和95KD
答:
单一
浓度的胶
10或12%的就可以了。10%比较适合分离30-200 kDa的分子,12%适合分离20-150kDa的分子,所以看你其他
蛋白
的分布。不过这两种浓度都没问题的。
我的分子量为62
KD和65KD
用多大浓度的分离胶
和浓缩胶
答:
浓缩胶基本都是5%的就可以,
分离胶
建议10%的吧,电泳大约1小时以内(电压170),半干转膜大约40分钟以内(恒压)。
40
KD
或50KD大小
的蛋白用多大浓度的分离胶
比较合适
答:
12%
的分离胶
。
蛋白质的
分子量在120
KD
,做
western
blot 跑胶时,
用多大浓度的胶
,蛋白...
答:
15% 15~45kDA 7.5% 30~120kDA
胶浓度
越大,跑
的蛋白
分子量越小,你可以选择6%的,不过那样的话你就要跑就点,一般恒压140V跑。而且你的蛋白很浅应该不一定是跟胶有关,很多因素啊。也许你的抗体不是很好用(很细我不知道你什么意思,一般都是呈带状),或者你上的蛋白太少了,一般我...
关于小分子
蛋白的Western
-blot问题,实验时
的胶浓度
,电压,转膜条件等等...
答:
1。当然是
胶
的浓度。9kda的话要适当增大,15-20%应该差不多吧。如果实在不行还能考虑用gradient gel。2。二是转膜缓冲液,内要含20%甲醇,新鲜配制,反复
使用的
话注意甲醇会蒸发掉。如果连续使用的话两三次应该还可以。甲醇一是能够洗掉跑胶时泡透了的SDS(SDS使
蛋白
带负电,方便移动),二是帮助...
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