配制培养基的原则和步骤如下:
一、配制培养基的原则
1、目的明确:根据需要培养的微生物种类,确定所需的营养物质和配比。
2、营养协调:各种营养物质在培养基中的比例要协调,以保证微生物的正常生长。
3、理化适宜:培养基的pH、渗透压、水活度、氧化还原电位等理化条件要适宜。
4、经济节约:在保证培养效果的前提下,尽量选择廉价且易于获得的原料。
二、配制培养基的步骤
1、称量原料:根据需要称量适量的干粉培养基或液体培养基原料。
2、溶解原料:将称量好的干粉培养基或液体培养基原料加入适量的水中,搅拌均匀。
3、调节pH:用酸或碱调节培养基的pH值至适宜的范围。
4、加水定容:将调节好pH的培养基加入适量的水,使总体积达到要求。
5、分装:将培养基分装到培养容器中,注意避免污染。
6、加棉塞或封口:用棉塞或封口膜封口,以防止污染和水分蒸发。
7、灭菌:将培养基放入高压灭菌锅中进行灭菌,一般采用121℃灭菌20-30分钟。
8、冷却:灭菌后将培养基取出冷却至室温或所需温度。
9、保存:将配制好的培养基放在阴凉处保存,并注意标签和日期。
培养基中常用的营养物质
一、常用的营养物质
培养基中常用的营养物质包括碳水化合物、含氮物质、无机盐、维生素和水等。不同微生物对营养物质的需求略有不同,需要根据不同微生物的营养需求配制针对性强的培养基。
二、碳水化合物
其中,碳水化合物是主要的能源物质,含氮物质主要用于合成微生物的蛋白质和核酸等,无机盐则参与构成微生物的细胞结构,维生素和水等也是微生物生长所必需的。此外,有些培养基还需要添加生长因子、激素等特殊物质。