分子互作是生命体普遍存在的现象,其研究对于揭示生命活动的本质具有重要意义。分子互作主要分为核酸与核酸互作、核酸与蛋白互作、蛋白与蛋白互作三种类型。随着科技的发展,尤其是后基因组时代的深入,高通量筛选生物标记物和寻找生物关联分子变得可能,对分子互作技术的应用提出了更高要求。金开瑞作为专注于分子互作机制研究的公司,拥有丰富的互作类项目设计和实施经验,提供从方案设计到技术实施的整套服务,帮助科研工作者深入了解分子互作。
在核酸与核酸互作中,miRNA 和 lncRNA 的相互作用是研究生命活动的关键。通过MS2-RIP和双萤光素酶技术,可以深入研究 lncRNA 和 miRNA 的相互作用机制。双萤光素酶报告系统作为一种评估基因表达的工具,通过内对照和外对照的设置,能够准确检测基因表达的相对改变。金开瑞应用Promega公司的双萤光素酶报告基因检测(DLR)系统,提供高效、准确的检测服务。
在核酸-蛋白互作领域,RNA pull down技术、DNA pull down技术以及RIP技术是研究核酸与蛋白相互作用的重要手段。RNA pull down技术通过标记生物素RNA探针,与胞浆蛋白提取液孵育,结合链霉亲和素标记的磁珠,分离出RNA-蛋白质复合物,通过WB实验验证特定的RNA结合蛋白是否参与互作。DNA pull down技术用于分析蛋白质与DNA的互作,通过设计并制备特异性探针,与核提取物孵育,利用亲和素磁珠纯化蛋白质DNA复合物,通过WB或质谱方式鉴定蛋白质类型。RIP技术则是研究细胞内RNA与蛋白结合情况的技术,有助于发现miRNA的调节靶点。
蛋白-蛋白互作是生命活动中执行功能的重要途径。免疫共沉淀、GST pull down、酵母双杂交技术等是检测蛋白分子间相互作用的有效手段。免疫共沉淀实验结果更接近真实生理条件下蛋白相互作用信息,而GST pull down技术则可用于研究蛋白之间是直接还是间接相互作用。酵母双杂交技术则是一种成熟的蛋白-蛋白互作研究工具,被广泛应用于互作蛋白的筛选、蛋白相互作用的鉴定/验证、蛋白互作机理的探究、蛋白连锁图谱绘制等工作。
金开瑞生物微信公众号菜单栏讲座回放提供了分子互作系列讲座和蛋白质组学系列讲座,涵盖互作检测相关技术培训、双荧光素酶验证互作的原理和应用、RNA pull down磁珠富集技术详解、蛋白-DNA互作技术EMSA实验详解、酵母双杂交研究策略培训等内容,帮助科研工作者深入了解和掌握分子互作研究的最新进展和应用策略。
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