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为什么SDS蛋白质电泳没有条带,而前沿出现透明带
如题所述
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推荐答案 2017-01-01
条带的歪斜和上样量有一定关系,各个泳道上样量不一致可能导致条带的歪斜。再就是看看你的电泳缓冲液是否时间长了,一般电泳缓冲液用3~5次就要换新的。
凝胶的配置要注意pH值和混合均匀,如果胶不均匀,也会影响条带。
从你后面的描述中,感觉你的电泳缓冲液可能有问题(缓冲能力不够)。跑胶的时间太长了,我一般跑胶2~2.5小时。查查电泳缓冲液的pH值。
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sds
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一条白色的
条带
答:
2、过度加热样品
,过度加热样品会破坏蛋白质脱变性,导致不纯净的白色条带。3、
样品太浓或没有充分稀释
,如果样品太浓或没有充分稀释,则可能导致蛋白质在电泳过程中过度聚集或不完全脱变性,形成白色条带。4、
可能是凝胶电泳过程中处理样品的方法有误
,检查操作步骤是否正确执行,设备是否正常等问题。
为什么SDS电泳
标准
蛋白没有条带
答:
或者marker没选好,分子量太小,时间太久marker跑出去了
sds
-page
电泳
时
蛋白
样品
没有
跑
出条带,
急求原因
答:
可能有几个原因:一:上样缓冲液
,用分子克隆上的配方做一次试试看(你所用的缓冲液是不是很久了?)二:如果你染色,脱色都没有问题,PAGE胶是不会说谎的 三:不知道你是在哪种波长下所测得有数值?280nm是共轭双键的吸收波长,很多物质都会有吸收,如果做亲和层析时咪唑也有吸收,RNA在280下也有...
做
蛋白质
的
sds
page
电泳为什么
脱完色
没有条带
答:
染色后,还需要脱色液(有乙醇、醋酸)脱色,不脱色的话全是蓝色,不能区分条带
。脱色后,条带才能显示出来。在跑SDS-PAGE时,需要点Marker,正常情况在染色、脱色后能至少看到Marker的条带。如果Marker都没有,那就是电泳问题了。蛋白浓度不够、跑胶的时间过长或过短、仪器问题、正负极不要插反。
SDS
聚丙烯酰胺凝胶
电泳 没有条带
答:
首先确定胶制的没有问题,其次,更换新的
电泳
缓冲液和marker,最后检查电源正负极
有没有
插到。如果Marker也
没有出带,
说明电泳及染色有问题,如电泳缓冲液的配制,胶的制备,染色方法等.如果Marker
出带而
目的片段没有,说明没有目的片段,应该是前期实验的原因.或跑出胶外,说明片段太小,或电泳时间太长.
SDS
-PAGE
电泳
跑不
出条带
答:
染色后,当然还需要脱色液(有乙醇、醋酸)脱色,不脱色的话全是蓝色,不能区分条带。脱色后
,条带
才能显示出来。在跑
SDS
-PAGE时,需要点Marker,正常情况在染色、脱色后能至少看到Marker的条带。如果Marker都
没有,
那就是
电泳
问题了。
做
蛋白质
的
sds
-page
电泳为什么
脱完色
没有条带
?
答:
1
,蛋白
太少或者根本
没有蛋白
加入(可以试试银染,银染没有结果就应该没有蛋白)2,脱色时间过长
sds
-page
电泳
测定
蛋白质
相对分子质量,分析看不到
条带
的地方是否有蛋白...
答:
SDS
-PAGE
电泳
是一种将
蛋白质
按照分子量大小分离的方法,通常需要使用染色方法(如Coomassie blue染色)来观察电泳条带。如果某些样品在电泳后看不到
条带,
则可能是由于样品中蛋白质浓度太低或者电泳条件不合适导致的。此时,可以使用Western blot等方法来检测是否存在目标蛋白质。如果Western blot结果呈阳性,...
sds
-page
电泳为什么
跑不
出蛋白条带
?连marker的也
没有
。请高手指教,详细...
答:
上样缓冲液混合后进行变性
,温度必须要超过95°,时间5—10min,如果没把握,可以处理10min。也有可能是漏胶,制胶时封胶要严,操作不熟练时可以多加一点,待聚合后用去离子水加入电泳槽内,看看是否会漏,如果不会把水倒掉,滤纸吸干后再加入凝胶。加样的问题,加样时注意不要刺破凝胶,以避免样品...
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