dnatm值较高的哪种核苷酸

如题所述

DNA的Tm值较高是dCMP,dGMP核苷酸含量较高。

天然状态的DNA,在比较高的温度下(70-90℃)会发生变性,这时,双螺旋解开为单链,并变成无规则线团。在光学性质上则产生“增色效应”,即紫外吸收(在260毫微米波长处)值升高。这同一般结晶的熔化现象类似。

引起DNA发生“熔解”的温度范围比较窄,只有几度。通常以增色效应达到最大值的一半时的温度叫DNA的熔解温度(或熔点),以符号Tm表示。不同序列的DNA,Tm值不同。DNA中G-C含量越高,Tm值越高,成正比关系。

测定原理:双链DNA在热变性时吸光度的增高是温度的函数,以相对吸光度为纵坐标,温度为横坐标作图,查得吸光度增加专时的温度,即为了Tm。材料和试剂:小牛胸腺DNA,溶于0.1XSSC缓冲液中。

将记录的温度和相应的吸光度整理成表,将各吸光度乘以相应温度的相对膨胀体积(VT/V25),以校正成相当于25℃水溶液体积的吸光度。用校正后的各吸光度除以25℃的吸光度,得出各个温度的相对吸光度。

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