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高效液相色谱实验之前流动相应如何处理?为什么
如题所述
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推荐答案 2015-06-01
混合摇匀(为了使流动相混合均匀)
减压抽滤(为了去除溶液里面的气泡。因为液相色谱仪器很精密,气泡进入仪器会堵住泵,堵住
色谱柱
)
超声(也是为了脱气和混合。不过主要是为了溶剂瓶壁上和溶液之间的气泡)
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为什么
作为
高效液相色谱
仪的
流动相
在使用前必须过滤,脱气
答:
使仪器正常工作。
作为高效液相色谱仪的流动相在使用前必须过滤
,脱气是因为过滤可以除去溶剂中的机械杂质,脱气可以防止空气进入色谱柱,使检测器噪声减小,基线稳定,使仪器正常工作。
为什么高效液相色谱
前必须要进行除气?
答:
用于高效液相色谱的流动相必须事先除气
,否则容易在系统中逸出气泡,影响泵的工作。气泡还会影响色谱柱的分离效率、检测器的灵敏度、基线的稳定性,甚至使其无法检测。噪音增加,基线不稳定,突然跳跃。此外,溶解在流动相中的氧可以与样品、流动相甚至固定相(如烷基胺)发生反应。溶解气体也会引起溶剂ph值...
高效液相色谱
法使用
流动相
前
为什么要
脱气?方法有哪些?
答:
HPLC所用流动相必须预先脱气,否则容易在系统内逸出气泡,影响泵的工作
。气泡还会影响柱的分离效率,影响检测器的灵敏度、基线稳定性,甚至使无法检测。噪声增大,基线不稳,突然跳动。此外,溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相(如烷基胺)反应。溶解气体还会引起溶剂pH的变化,对分离或分析...
用于
高效液相色谱
的
流动相
通常需要经过
什么处理
答:
纯化及脱气。高效液相色谱所用的流动相处理包括水的处理、溶剂的提纯、溶剂的过滤与脱气等
,脱气是指在流动相中去除空气,以避免在分析过程中出现气泡。色谱又称色层法或层析法,是一种物理化学分析方法。
高效液相色谱
的
流动相要
经过哪些
处理
答:
流动相要先
过滤
,超声脱气后方可使用。另外选用试剂是要选用色谱级的,过滤时选择合适的滤膜。流动相最好现配现用,不要保存太长时间。使用旋转蒸发仪上的真空泵 抽空气20min,可以达到脱气的作用。使用滤膜过滤掉杂质。流动相必须过滤膜,用前要超声
除气泡
半个小时左右,否则基线不稳 仪器和色谱柱先要...
高效液相色谱
的
流动相要
经过哪些
处理
答:
1、pH值调节,酸度影响出峰时间.2、
过滤
膜,一般为0.45微米,注意水性和油性的区别.3、脱气,一般超声.其实就算有在线脱气,最好也先超声脱气.
高效液相色谱
法对
流动相
有
什么
要求?
答:
高效液相色谱
法对
流动相
的要求如下:1、选用的溶剂
应当
与固定相互不相溶,并能保持色谱柱的稳定性。2、选用的溶剂应有高纯度,以防所含微量杂质在柱中积累,引起柱性能的改变。3、选用的溶剂性能应与所使用的检测器相匹配,如果使用紫外吸收检测器,就不能选用在检测波长下有紫外吸收的溶剂;若使用...
高效液相色谱
法测定时,
流动相
合样品均应先
过滤
和超声波,
为什么
答:
流动相需要
过滤
、超声,过滤是除去固体杂质或异物,同时驱除溶解的气体,超声进一步驱除溶解的气体。样品需要过滤,防止不溶性物质堵塞系统的管路,样品不需要超声,超声过程往往伴随温度升高,样品一旦温度升高液体的体积会改变,浓度发生变化,影响到结果的准确性。
高效液相色谱
操作步骤是
怎样
的?
答:
高效液相色谱仪操作流程为开机、超声、排气、走基线。1、开机前先将流动相
过滤
和超声:水流动相用混合滤膜(0.2μm)过滤,有机流动相用有机滤膜过滤,之后超声脱气15-20分钟。(过滤的目的是除去流动相里的杂质,以免杂质进入色谱柱堵塞色谱柱;超声的目的是排除流动相里面的气体,以防气体进入色谱柱...
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