细胞的生长需要外界环境无污染环境、基质、气体环境和氢离子浓度、液相环境。
细胞的营养需要:
1、基本营养物质:氨基酸,维生素,葡萄糖、核糖、脱氧核糖等,无机离子等;
2、促细胞生长因子:多由血清提供。
细胞的生存环境:
1、温度条件:不同生物来源的组织细胞培养温度不同;体外培养动物细胞最常用的温度是37℃。
2、气相环境:用5%CO2与95%空气(提供氧)的混合气体。
3、细胞生长的液相环境,水及平衡盐溶液,三蒸水,Hanks液、PBS、Earle液天然培养基:血清、组织提取液、水解乳白蛋白合成培养基。
4、培养液的酸碱度,大多数的有机体细胞能在pH6.0~8.0的环境中生存。最适宜的pH值范围是7.2到7.4。
5、无污染、无毒。
体外培养细胞的生存环境:
体外培养细胞的环境还必须具备一定的物理化学特性,维持细胞生存和增殖所要求的正常生理性条件,包括温度、渗透压、气相和pH等。
1、温度
体外培养的细胞需要在一定恒温的环境中才能生长,其适宜的温度取决于所培养细胞的类型。在达到所培养细胞耐受温度的上限之前,细胞增殖率随温度的升高而加快,温度超过上限后,细胞增殖受到抑制。
当温度为2535P,细胞的生长速度虽然很慢,但仍然能够维持存活能力,即是在4°C条件下,细胞也能存活数天,温度只要不低于0°C度,细胞代谢虽受抑制,但对细胞的损害并不严重,若加入保护剂,细胞可在一196-C的液氮罐中保存。
2、渗透压
多数培养细胞对渗透压有一定的耐受范围,耐受能力因细胞类型而异。哺乳动物细胞培养的渗透压一般介于260320mmol/L之间。
3、气相和pH
体外培养细胞需要适宜的气体环境。多数细胞需要在有氧条件下才能生长,氧分压通常维持在略低于大气的状态,CO?也是细胞生长所必需的。各种细胞对pH的要求不尽相同,多数细胞在pH7.27.6间生长良好。