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SDS-PAGE制胶时总是凝固的很快,加TEMED太少又担心不凝固,谁遇到过同样的情况
SDS-PAGE制胶时总是凝固的很快,加TEMED太少又担心不凝固,谁遇到过同样的情况
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推荐答案 2006-09-22
TEMED是增速剂,加少了也不会不凝固。
关键是AP的使用,AP只是起到引发反应的作用,加入极少量即可,一般是几个微升,千万不要加多,否则凝固速度过快,来不及灌胶就会凝固,即使能来得及灌胶,制出凝胶也是不均匀的。而且AP要在最后加入,如果配胶之后无法及时灌制,就不要加AP了,到灌胶之前再加入AP混匀。
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其他回答
第1个回答 2006-09-22
最后一步再加AP和TEMED,搅拌后马上到入模具中呗
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关于WesternBlot
SDS-PAGE胶
若干问题
答:
答:1)、先确定AP、
TEMED的
量都没问题,应该有各浓度的配方的
,加少
了或者没加的话就不会凝了;2)、温度和湿度太大,也会影响
胶的凝固
。分离胶灌入并水封好以后,把整个架子移到37℃培养箱中,能加快凝胶时间!2、问:
SDS-PAGE
电泳的分离胶凹凸不平怎么回事?答:可以考虑如下几个因素 1)、...
SDS-PAGE
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胶不凝固
答:
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TEMED,
可加速凝固 3,配好胶后放在温箱里凝的快些,环境温度低会影响凝的速度。我在冬天会灌好胶后放在培养箱里,一般很快就凝了,可以提高效率,一天最多可以跑5次。最后
,经常
出现浓缩胶凝但不成形,非常粘,这是因为C液(浓缩胶缓冲液)的pH值不对,重新配制...
SDS-Page
电泳,我配的
胶总是不凝固
答:
应该是pH有问题
。如果pH不合适,即使加再多TEMED和过硫酸铵都不管用,即使凝了,跑胶也不顺利。
SDS-PAGE
电泳中
TEMED
浓度及用量
答:
根据凝胶的比例不同
,TEMED的
量也是不同的。TEMED可以加快凝胶的凝固速度,用量不一定不变,可以根据需要增加用量,或者在效果不好
的时候
加大用量。两微升到四微升都可以。这是我做实验时的一点经验,不知道适不适合。
SDS-PAGE
凝胶制备技巧,易翻车点及其解决方法汇总(五年经验结晶)_百度...
答:
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tricine
sds
page
为什么浓缩
胶总是不凝
呢?
答:
检查一下AP和
TEMED
1.AP有可能是吸水结块了 或者是被氧化了 配
的时候
尽量去中间的部分 可以试试加大AP的量 2.TEMED吸水或氧化了 看看颜色是否已经很黄了 如果是就要换新的 3.可以试试将胶放入烘箱 30℃ 可以加快凝
胶凝固
以上都是我试验的经验啊 做了很久才把这个问题解决 ...
SDS-PAGE
蛋白电泳条带跑的有点倾斜是什么问题??求专家解答
答:
胶不匀吧 或者电压太高
sds
page
配
胶时
为什么过硫酸铵和
temed
要最后加入?
答:
这是因为空气中的氧分子会氧化AP使其活性减弱。加入这层水后可以让反应快速进行,同时也保证了分离胶上层面的平整。因此,我们最后加,防止催化活性的减弱。当然操作快和熟练的这个影响也没那么大。胶能不能制好是个关键,这个受外界环境的影响很大。祝福你跑个好胶。
SDS-PAGE
marker跑不开
答:
分析:1 积层胶凝的慢就应该有问题,大概应该有10分钟就行了 看看你的配方是不是有问题,或者试剂有过期的,看看过硫酸铵吧(APS)这个最好现用现配 配方:5%浓缩胶制备(4ml):取2.7ml去离子水,浓缩胶贮存液0.67mL, Tris-HCl 缓冲液(PH6.7)0.5mL
,
TEMED
4.0μL, 10% 过硫酸胺0....
大家正在搜
加热时会凝固的东西是什么
液体胶怎样快速凝固
怎样让胶水快速凝固
0°时混凝土凝固时间
结构胶五天了还不凝固
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