用法区别：
that：引导定语从句时，既可以指人，也可以指物。指人时，相当于who 或whom；指物时，相当于which。在定语从句中作主语或宾语，作宾语时常可省略。
which：指物，在定语从句中作主语或宾语，做宾语时常可省略。
who：指人，在定语从句中作主语，有时也作宾语。
that、which、who的区别：含义不同、用法不同、侧重点不同
一、含义不同
1、that
pron. 那。conj. 引导从句。adj. 那个；上文提到的。adv. 非常；那么地
2、which
adj. 哪一个；哪一些。pron. 哪一个；哪些
3、who
pron. 谁。abbr. 世界卫生组织(=World Health Organization)
二、用法不同
1、that
that用作指示代词的意思是“那，那个”。可指前面提到的那件事，也可指在空间或时间上较另一事物远的事物或人，还可指要表明的或要提及的事物、想法等。
I am well aware that this is a tough job.
我深知这是一件棘手的工作。
2、which
which用作疑问代词时，在特殊疑问句中用作宾语或主语。
which用作关系代词，可引导限制性定语从句或非限制性定语从句，引导非限制性定语从句时which可以用整个主句作为其前行词，相当于and that，有时还可引导不定式短语从句。
It's hard to say which is better.
很难说哪一个好些。
3、who
who用作疑问代词时，意思是“谁”，一般只用来指人,在句中用作宾语或主语。
who用作限制性或非限制性的关系代词，意思是“…的人，那个…”“他，她，他们”，在句中作主语。
I wonder who will play in the basketball match.
我不知道这场篮球赛谁会上场。
三、侧重点不同
1、that
用作关系代词时两者均可指人，当先行词是一个既指人又指物的并列词组时通常要用that。当先行词是who时通常要用that。
that可引导定语从句，当先行词是all, everything，nothing，anything, little等不定代词，或被first， last，only，few，much，some，any，no等词修饰时，应该用关系代词that，不用which。
当先行词为形容词最高级所修饰时，关系代词用that不用which。
2、which
which可引导定语从句，非限制性定语从句所修饰的是物或是整个主句时，关系代词用which，不用that。
当定语从句由介词加上关系代词来引导时，该关系代词代替的是物而不是人时，不能用that，只能用which。
3、who
用作关系代词时两者均可指人，在正式文体中，用作关系代词的who可以用于人称代词he，she之后。