你提取的质粒DNA分子在琼脂糖凝胶电泳中表现出几条带？并解释这种现象？

如题所述

推荐答案 2017-04-14

如果是用试剂盒这种、或者提取时候操作比较好的、同时菌也摇的比较密的，一般抽提出来的质粒跑电泳是可以看到3条带的，他们从上到下分别是开环、线性、负超螺旋的质粒。
主要原因是琼脂糖凝胶电泳是根据分子在电场中的迁移速率来区分不同大小的DNA的，但这有一个局限性，就是凝胶本身是存在空间位阻的，同一个质粒上述3种不同的结构，虽然在碱基数量上完全相同，但在空间结构上，负超螺旋最小，在电泳中迁移速率最快，因而跑在前面，开环因为空间位阻最大因而跑的最慢。

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其他回答

第1个回答 2009-12-07

三条
最慢的一条是超螺旋，中间的是开环的，最下面一条是直链本回答被提问者采纳

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(急)大家帮忙一下,质粒DNA琼脂糖凝胶电泳2号的现象分析答：图上看，你的质粒提得不好，超螺旋浓度不高，而且几种状态的DNA都有。手熟的或者用试剂盒提，一般就是2条带。

求专家解释为什么我们提取的质粒DNA跑完电泳后有四条带,一条在六千左右...答：回答：呐~没有图,我就猜测一下哈。如果你的质粒本身就是20K左右的,那么: 6K左右的那个条带可能是超螺旋的质粒后面三条20K左右的,依次是开环质粒,线性质粒,以及复制中间体。

大肠转化后提的质粒,跑电泳出现3条带,求高人解释每条带分别是什么?(第...答：在琼脂糖凝胶电泳中不同构型的的同一种质粒DNA,尽管分子量相同，但具有不同的电泳迁移率。其中跑在最前沿的是共价闭合DNA，其后依次是线性DNA和开环DNA,其原因是共价闭合的DNA其空间位阻最小，所以跑得最快。而开环DNA空间位阻最大，所以跑得最慢。不过并不是每次提取的质粒都有三条带，两条带的情...

质粒dna在琼脂糖凝胶中应为一条带,但有时出现三条带的原因有哪些答：在琼脂糖凝胶电泳中，质粒DNA理论上应表现为一条带，然而，有时会出现三条带的情况。这并不罕见，主要是由于质粒DNA的三种可能构象：超螺旋、环形和线性。超螺旋是最稳定的形态，但在一定的降解条件下，它可能会转化为线性或更不稳定的形式。每种构象在电泳中的移动速度不同，因此在凝胶上会形成三条...

质粒dna在琼脂糖凝胶中应为一条带,但有时出现三条带的原因有哪些答：质粒DNA原则上是一条带，但通常跑胶会看到三条，这是正常情况。因为质粒是环形的DNA，稍有降解就会变成一条为线性，再厉害些，就成了线性DNA，三者在琼脂糖凝胶中速率不同，自然会出现三条带。标准就是三条带，有时候两条。因为质粒有不同的构象：超螺旋、环形、线形，电泳速度是不一样的。

质粒DNA跑电泳为什么会有三条带?答：分离速度不同，分成三带。闭环（超螺旋），开环，线形的螺旋率依次降低。质粒DNA原则上是一条带，但通常跑胶会看到三条，这是正常情况。因为质粒是环形的DNA，稍有降解就会变成一条为线性，再厉害些，就成了线性DNA，三者在琼脂糖凝胶中速率不同，自然会出现三条带。

提取到的质粒DNA有几种问分子状态,在凝胶电泳所得图片中如何区分?答：在松散环状DNA的基础上进一步盘曲折叠形成的紧致的环状DNA）其实这三种结构分子量相同，由于空间结构的差异导致在琼脂糖凝胶电泳中迁移率不同，因此出现三条条带。标准的质粒提取实验中只存在后两种结构，线性DNA是由于提取操作过于剧烈或缓冲溶液pH不适宜造成的DNA断裂。过于震荡可造成电泳条带拖尾现象。

制备的质粒DNA样品琼脂糖凝胶电泳后会出现2至3条带,为什么?可采取什么...答：质粒有三种状态：超螺旋、开环、线性。开环是超螺旋结构中1条链的断裂，线性就是2条链都断了。要想提高质粒的超螺旋比例，提取的时候各个尽量轻柔，一般在TE溶液中，DNA酶的作用基本上都被封闭了，质粒的断裂大部分来自与溶液的剪切力。所以各步骤操作的轻柔很重要。不过这种开环对质粒的转化转染影响...

如果质粒DNA(假定提取的质粒DNA只有超螺旋一种结构)酶切电泳后,在琼脂...答：单酶切?双酶切?一个位点?两个位点?? 单酶切一个位点,完全一条带,不完全两条带,单酶切两个位点,完全,两条带,不完全,三条带,双酶切,完全两条带,不完全,三条带

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