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细胞收取后可以 先用液氮处理 后续再提取rna吗
如题所述
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推荐答案 2017-08-20
实际操作中或多或少都会有降解,液氮的低温能极大减缓这一过程,除此之外用RNase-free的器具、减短操作时间、避免直接对样品呼气等都是可以提高提取的RNA的质量的方法。
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其他回答
第1个回答 2017-08-20
破处细胞壁可以用液氮处理研磨
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手把手教学——
RNA提取
的实验步骤&注意事项
答:
小心转移水相,取约600μL,用异丙醇沉淀
RNA
,确保混匀,必要时加糖原增强纯度。离心后丢弃上清,彻底去除液体,用乙醇清洗并干燥或真空干燥RNA。避免加热,低温溶解RNA,如需加热,控制在40°C。FreeZol法与TRIzol类似,先混匀匀浆,离心后取上清,加异丙醇混匀后离心,再用乙醇清洗并晾干或稀释溶解。...
RNA
的
提取
方法步骤及原理.
答:
RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一种总
RNA抽提
试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速裂解
细胞
,抑制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行
提取
组织或细胞中的RNA。Trizol作用原理:在匀质化或溶解样品中,Trizol试剂可保持RNA的完整性,同时能破坏细胞及溶解细胞成分。加入氯仿离心后,裂解液分层成水...
实验技能 | 第二期:常见核酸(
RNA
)
提取
和纯化的方法
答:
细胞样本:
处理
后立即冷冻,贴壁细胞需清除培养液后操作。步骤详解</遵循抗凝处理的步骤,将血浆分装到无RNase离心管,确保无细胞污染。血浆样本需在-80°C长期保存,严防降解。根据样本类型,选择合适的处理方法,如全血用TRIzol法,血细胞则需消化白
细胞后
保存。
RNA提取
路径图</收集样本,根据细胞类型选择...
...
可以
长期存放在-80度吗?待样品量多的时候
再提RNA
?
答:
我不太清楚你的问题是否是: 加
RNA
iso PLUS裂解后,不进一步离心
提取
,直接放在-80度?如果这是你的问题,我强烈不建议,这个完全违反试剂的protocol,人为增加了试验的不确定性。RNA保存中的的降解和纯度及保存液都有关系。这些常规的试验步骤还是follow protocol吧 ...
【求助/交流】
提取
真菌DNA或
RNA
一定要
液氮
研磨吗?
视频时间 13:31
材料不小心掉地上,立刻
用液氮处理
,影响
RNA提取
吗?
答:
如果地面不干净,样品战刀一些地面的细菌啦什么的,或许会影响到
提取RNA
的纯度。这个做好是重做的好
如何选择正确的
RNA提取
方法
答:
1. 使用正确的
细胞
或组织储存条件 在样品
用液氮
瞬间冻结之后,应该储存在-80°C,千万不能解冻。即使是置于含有胍盐的裂解液中作匀浆前的短暂解冻,也会导致
RNA
的降解和损失。瞬间冻结的组织应该首先在超低温条件下先研磨成粉,然后置于裂解液中进行匀浆。RNAfixer使样品储存更为便利。储存在RNAfixer中的...
提取RNA
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答:
--自己的一些经验-- 之前都是在
提细胞
的
RNA
,用量一般是细胞瓶/6孔板的一个孔用1ml,12/24孔板用0.5。 彩艳姐的意思是,这个用量是足够多的,一般就按照这个量来加就可以了。
后续
异丙醇等按照trizol的用量来加。 操作过程中都是无酶的用具,冰上操作。看完了丁香师兄的protocol和经验...
材料没有
用液氮
速冻,
可以
提出
RNA
答:
可
rna
降解主要由内外源rna酶造成 内源酶很“顽强” 虽然在完整组织里它们基本不开工 但
细胞
一破 即使是冻过的材料 它们也活跃工作,速磨(破碎)、速加酶灭活剂 速混匀,很关键.超低温冰箱在保持期间一般能完全让其停工,化冻了
提取
过程中还是又活回来.用试剂盒还是常规方法,都建议先用部分富足的材料...
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