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    • 胶回收前所切取的胶块大小对胶回收效果有何影响？

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    推荐答案   2019-06-01
    应该是两条挨得很近的条带。
    可能是pcr回收产物有杂带污染，跑pcr产物的时候没有分开，然后回收纯化以后，再跑就分开了。这个酶切之后跑电泳也是两条带。双酶切的话，没关系的，照样回收照样连，照样出结果。
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    胶回收前所切取的胶块大小对胶回收效果有何影响?答：可能是pcr回收产物有杂带污染，跑pcr产物的时候没有分开，然后回收纯化以后，再跑就分开了。这个酶切之后跑电泳也是两条带。双酶切的话，没关系的，照样回收照样连，照样出结果。
    为什么切胶的体积会影响DNA回收率答：第二，如果胶块大，溶胶液的用量却不够，胶块因为未充分溶解而粘附在DNA吸附试剂上，使吸附试剂要释放DNA到水中时出现阻碍，同样影响回收率。因此，为提高回收率故意减少溶胶液体积也是不行的，只能在切胶时将胶块切得尽可能小，包含所需DNA条带即可。
    切胶大小,如何影响回收率答：越小越好，除了有DNA的那块，旁边的尽量少切
    影响切胶回收效果的因素有哪些答：影响回收率的因素很多，如DNA片段大小、点样量、凝胶种类、电泳缓冲液的缓冲能力、切胶操作、紫外灯照射强度和时间、溶胶是否彻底等等，所以不能单凭1-2次的实验来判断其质量好坏，最好是多做几次实验或用几种不同品牌的产品做平行对照实验，结果相对真实。
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