如何提高临床微生物检验标本的采样正确率

如题所述

  一、 血液标本的采集
1、 皮肤消毒程序: a.75%酒精清洁局部皮肤30s以上。b.待皮肤干后,再用1%-2.%碘酊作用30s或10%碘伏作用90s以上,从穿刺点中心部位向外画圈消毒,范围不应小于3cm(直径),且不能用手指触摸消毒后的皮肤。c.皮肤碘酒干后(约1min),穿刺采集血液,采血量成人10-20ml,婴幼儿1-2ml。儿童3-5ml。d.培养瓶消毒程序:70%酒精擦拭血培养橡皮塞,作用60s;用无菌棉签清除橡皮塞表面残余酒精。用注射器无菌采血后立即在床旁接种培养瓶,并迅速轻摇,充分混匀防止凝固,但又不可剧震以防溶血。立即送检,切勿冷藏。一般情况下可把血培养瓶放20-22℃。不放冰箱。
2、注意事项:a.怀疑菌血症应尽早采血,体温上升(38.5℃)采血可提高阳性率,但也要防止因等待而延误时机。b.对已经使用抗菌药物,而又不能停药者,也应在下次用药前采血。切忌不要在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本,也不能从静脉导管及动脉插管中取血。c.培养基与血液之比以10:1为宜,以稀释血液中的抗生素,抗体等杀菌物质;有人主张对接受抗菌药物治疗的病人,培养基与采血量之比可为20:1或大于这个比例。d.近年研究表明,将血液注入血培养基前,更换针头反而易导致污染。e.每例至少采血两次,间隔0.5-1h,以利于提高阳性率和区分感染菌与污染菌。f.疑为细菌性心内膜炎及布鲁氏病的病人,以肘动脉或股动脉采血为宜,除在发热期采血外,并要多次采血(24h3-4次)和增加采血量(可增加10ml)。g采血后立即送检,如不能立即送检可置室温,而不能放置冰箱。h如临床表现很似败血症,而血培养多次阴性者,提示考虑厌氧菌和真菌感染的可能。
二、骨髓的采集
1、采集方法:在病灶部位或髂前(后)上脊处严格消毒后抽取骨髓1ml,注入血培养瓶内。
2、注意事项:a.骨髓内含有大量的单核巨噬细胞系统的细胞,因而骨髓培养对伤寒病人的诊断较血培养优越。b.用于怀疑细菌性骨髓炎病人。
三、静脉导管标本的采集
1、采集方法:a.常规导管部位皮肤消毒。b.无菌方法从病人体内拔出静脉导管,剪下导管尖端5cm,放入无菌瓶中。立即(15min内)送检,避免标本干燥。4℃保存不超过2小时。
2、注意事项:a.剪下的导管立即接种血平皿,在血琼脂平板上交叉滚动4次。然后弃之。可提高阳性率。b.肉汤反复冲洗导管腔内,冲洗液做定量培养。
四、呼吸道痰标本
1、采集方法:a.清晨起床后用凉开水漱口多次,以除去口腔内大量杂菌,用力咳出肺深部的脓痰,置于清洁干燥容器中送检。b.痰量极少者可用45℃3%-5%的氯化钠溶液约5ml雾化吸入min,进行导痰。对于咯痰量少的幼儿,可轻轻压迫胸骨上部的气管,当其咯痰后用无菌棉棒采集标本。c.咳嗽无力或昏迷病人,可用吸痰管经鼻腔或口腔经气管腔内吸引痰液送检。d.气管切开者可以深入透气孔中取痰。e.可用支气管镜直接在病灶部位采集高浓度的病原菌。f.用无菌导管经鼻腔插入气管镜内,缓慢注入无菌蒸馏水5ml,取出导管。留取患者在3h内咳出的痰液,放入无菌容器中送检。
2、注意事项:a.痰标本的采集以晨痰为准,此时患者痰量较多且含菌量也多。b.标本采集后立即送检,若不能及时送检者,可暂存4℃冰箱。若晚1-2h接种,会失去苛氧菌,并使得革兰阴性菌过分生长。c.可接受的标本:痰;支气管灌洗液,支气管刷,支气管活检;肺吸出物和肺活检。不能接受的标本:唾液;24h留的痰(结核杆菌培养除外);拭子。d.痰标本的质量评价:(用显微镜筛选)在低倍镜下,检查鳞状上皮细胞,至少10个视野,集中在有白细胞处,合格标本为白细胞与鳞状上皮细胞比例大于2:1。
五、鼻咽喉拭子标本
A.用湿的拭子(生理盐水);需插两个鼻孔;深入3.3cm左右,转动4-5次;以上用于诊断金黄色葡萄球菌暴发时的鼻带菌者。
B.咽拭子、口腔拭子(1)采集方法(到细菌室取专用拭子)a.患者清水漱口后,由检查者将其舌外拉,用棉拭子将咽后壁或悬雍垂的后侧反复擦拭数次;b.化脓性扁桃体炎、口腔念珠菌病时,直接用棉拭子在病灶部位擦拭;c插入运送培养基中立即送检,防止干燥。
(2)注意事项a.棉拭子应避免触及舌、口腔黏膜和唾液;b.采集标本前数小时不可用消毒药物漱口或接触病灶局部。
六、胃肠道
1、粪便a.采集方法选取脓血、黏液粪便2-3g,液体粪便取絮状物1-2ml。盛于灭菌瓶中或蜡纸盒中及时送检。b.注意事项①标本要采集新鲜的,陈旧标本影响阳性检出率;②切忌粪尿混合;③若要分离阿米巴,标本要立即送检并注意保温;④运送培养基可提高阳性率;⑤分离难辨梭菌时需选不成形或水样便;⑥霍乱弧菌、大肠杆菌Ο157感染的腹泻便则为水样便或血性便;⑦标本在病理早期或治疗前采集;⑧一般认为用抗菌药三天后,标本培养病原菌阴性。
2、肛拭子在无法获得粪便的情况下,可用经无菌甘油水或无菌生理盐水湿润的肛拭子插入肛门4-5cm(幼儿2-3cm)处,轻轻旋转擦取直肠表面黏液后取出,置运送培养基中送检。
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