高效液相色谱原理大多是分配色谱,就是说样品被固定相(柱子填料)吸附以后,在流动相洗脱过程中,样品的极性不同,在流动相中溶解的浓度也不同,有的可以互溶,有的不容,有的有一定
溶解度。就可以根据这个原理进行分离。
流动相的选择与注意事项1.流动相性质(1)液相色谱的流动相根据作用可分为底剂和洗脱剂。底剂决定基本的色谱分离情况,洗脱剂对某几个组分选择分离。流动相组成改变,极性改变,可显著改变组分分离状况;(2)亲水性固定液常采用
疏水性流动相,即流动相的极性小于固定相的极性,称为正相液液色谱法,极性柱也称正相柱。正相柱的底剂用低
极性溶剂,洗脱剂则选用极性较强的针对性溶剂。(3)若流动相的极性大于固定液的极性,则称为反相液液色谱,非极性柱也称为反相柱。组分在两种类型分离柱上的出峰顺序相反。反相柱通常以水为流动相的主体,再加入不同配比的有机溶剂做调节剂。