植物检疫的洗涤检验是怎样做的?

如题所述

洗涤检验:检查附着在种子表面的各种真菌孢子、细菌或颖壳上的病原线虫时,由于肉眼或放大镜不易检查,一般可用洗涤检验。其方法一般从平均样品中任取10克、100克试样两份,分别放入三角瓶内,各注入无菌水10~100毫升,振荡5~10分钟,使附着在种子表面的病菌孢子洗下来。

如在无菌水中加入0.1%的湿润剂(如0.1%肥皂溶液或磺化二羧酸等)可以减少表面张力,使种子表面的病原物分离得更彻底。一般光滑的种子可振荡5分钟,粗糙的种子振荡10分钟,然后将悬浮液分别倒入洁净的离心管内,把盛有悬浮液的离心管放入电动离心机内,用每分钟2000~4000转的转速离心10~30分钟,使病原物完全沉于管底,再用橡皮吸管吸去上部上清液或倒出上清液,仅留下1毫升悬浮液在管底。

然后加2毫升乳酸酚固定液,使沉淀液再次充分悬浮,也可直接用手摇动离心管,让孢子重新均匀地悬浮起来,再将两管合并,立即用干净的细玻棒,将悬浮液滴于载玻片上,盖上盖玻片,用显微镜检查,鉴定病原种类,并计算每粒种子上的孢子负荷量。常用的孢子负荷量计算方法有两种。

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