sds-page条带弥散和蛋白糖基化有关系吗

Question

如题所述

Answer 1

是的，SDS-PAGE条带的弥散与蛋白糖基化确实可能有关系。糖基化可能造成蛋白质样品的多异质性，即相同的蛋白质有不同的糖链修饰形式存在，导致在SDS-PAGE上出现多个或弥散的条带。此外，糖基化也可能影响蛋白质与SDS结合的方式，从而影响其在凝胶中的迁移。
当然，SDS-PAGE的条带弥散可能还有其他原因，例如：
1.蛋白降解。
2.电泳条件不佳（如电泳缓冲液、电压、时间等）。
3.凝胶的问题，如聚合不佳、温度不适等。
4.样品的过度加热或不充分的变性。
5.使用的样品量过多。

Answer 2

SDS-PAGE是蛋白质分析与鉴定最常用的方法之一，它的特点是一定范围内蛋白质分子量的对数与迁移率线性相关，基于这一点，很多技术人员把SDS-PAGE作为定量检测分子量的手段。实际上，蛋白质在SDS-PAGE中的表观分子量与实际分子量往往有偏差，本文主要聊聊包括分子量偏差在内的三个问题：
不同蛋白质之间能进行分子量比较的原理
  关于SDS-PAGE的原理，网上有很多，千篇一律：在聚丙烯酰胺凝胶中，蛋白质的泳动速率与电荷和体积有关，SDS与蛋白质形成复合物，大量SDS所携带负电荷掩盖了蛋白质原有电荷，并且蛋白质-SDS复合体具有相似的形状（类似雪茄烟的棒状颗粒，我个人认为应该比喻为橄榄球状），电荷的差异消除了，形状也相似，那只有分子量这一个变量了。分子量大的，“个头”大，在凝胶中“行动迟缓”，分子量小的，“个头”小，迁移速率快。实验证明，在一定范围内蛋白质的迁移速率与分子量的对数存在线性关系。