实验后期生成的丙酮酸2,4-二硝基苯腙只会在碱性的环境下出现红棕色,家NAOH以帮助显色。
赖氏法测定血清谷丙转氨酶活力实验,基本原理是谷丙转氨酶作用于丙氨酸α-酮戊二酸后生成的丙酮酸与2,4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸2,4-二硝基苯腙,后者只有在碱性环境中才能显红棕色,所以需要加入适量的NaOH促进2,4-二硝基苯腙显色。
扩展资料:
测定血清谷丙转氨酶活力实验注意事项
1、在呈色反应中,2,4-二硝基苯肼可与有酮基的化合物作用形成苯腙,底物中α-酮戊二酸可与之发生反应,生成α-酮戊二酸苯腙。故制作标准曲线时,需要加入一定量的底物以抵消α-酮戊二酸的影响。
2、在测定 SGPT 活力时,应事先将底物、血清在37 ℃水浴中恒温,然后在血清管中加入底物,准时计时。
3、标准曲线上数值在20~100 U是准确可靠的,超过200 U 时,需将样品稀释。
4、丙氨酸应使用 DL-型,不使用 D-型。如使用 L-型,用量减半。
5、溶血标本不宜使用,因血细胞内转氨酶活力较高,会影响测定结果。