运用斜面低温方法保藏菌种要注意哪些问题？

Question

如题所述

Answer 1

1. 培养基的更换：保存菌种时，培养基的选择至关重要。过于丰富的营养会导致菌丝生长过旺，加速老化，并可能产生有害代谢物，从而影响菌种存活。通常，采用马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）斜面培养基较为适宜。例如，灰树花在PDA培养基上生长虽较为细弱，但不易老化，寿命较长；而在富含营养成分的PDA培养基上，虽然菌丝生长旺盛，但易老化，寿命较短。因此，针对灰树花，应轮流使用贫瘠和富饶的培养基进行保存，以利于保持其种性的优良和菌种的复壮。长期使用同一种合成培养基，菌丝生长速度会下降，出现老化、菌丝细弱、生长中断等症状，这是因为菌丝长期适应单一基质，某些酶活性降低。定期更换培养基，尤其是天然营养成分的改变，有助于恢复菌丝活力。
2. 菌龄与保藏温度：菌种的保藏期限与菌丝的培养菌龄密切相关。对于灰树花、木耳、姬松茸、灵芝等，菌丝长满斜面后再培养2至3天，使菌丝更加浓密、粗壮，增强对低温的抵抗力。在冰箱中，温度设定在4至8℃，可有效延长菌种的生命活力。而对于平菇、金针菇等，菌丝刚长满或即将长满斜面时即可保藏，这些菌种对低温的耐受性较强，在0至4℃的低温下也能缓慢生长，适宜的保藏温度有助于延缓子实体的形成。
3. 封口方式：使用棉塞封口的培养基容易失水干燥，而无孔胶塞会导致缺氧，灰树花的菌丝因缺氧而死亡或发生生理反应，产生色素等。在胶塞上钻孔，孔径1.5毫米，并用棉花封堵孔口，可以平衡保水和通气需求，经过9至12个月的保藏，菌种存活率可达80%以上。