怎样利用sds-page法测定某种蛋白质的分子量

如题所述

怎样利用sds-page法测定某种蛋白质的分子量如下:

电泳定义:带电荷的颗粒在电场的作用下向其电 性相反的的方向移动。电泳分类: 按电荷量分离 按分子量分离 按等电点分离。SDS-PAGE应用:测分子量;分离鉴定。因为通过生化方法吧蛋白提取出来,蛋白质带有电荷么,是将混合样品中的蛋白质。

其原理是第一向基于蛋白质PI不同用等电聚焦,电泳时的正极与负极都会发生电解反应,向着与其电性相反的电极移动的现象称为电泳。在外电场的作用下,带点颗粒将向着与其电性相反的电极移动,这种现象称为电泳。

电泳技术可用于氨基酸、肽、蛋白质和核苷酸等生物分子的分析分离和制备。 区带电泳是由于在支持物上电泳蛋白质混合物被分离为若干区带。胶体有电泳现象,证明胶体的微粒带有电荷。各种胶体微粒的本质不同,它们吸附的离子不同,所以带有不同的电荷。

在一定的支持物上,于均一的载体电解质中,将样品加在中部位置,在电场作用下,样品中带正或负电荷的离子分别向负或正极以不同速度移动,分离成一个个彼此隔开的区带。区带电泳按支持物的物理性状不同,又可分为纸和其他纤维膜电泳、粉末电泳、凝胶电泳与丝线电泳。

蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时,它的迁移取决于它所带电荷以及分子大小和形状等因素。在聚丙烯酰胺系统中加入阴离子去污剂十二烷基磺酸钠(SDS),大多数蛋白质能与SDS按一定比例结合,即每克蛋白质结合1.4g的SDS-复合物都带上相同密度的负电荷。

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