生物化学与分子生物学实验技术
第一部分,深入理解生物化学基础实验
第一章 生化实验基本技术
第一节 分光光度法
1.1 紫外及可见分光光度法:用于测定溶液中物质的浓度,原理简单,应用广泛。
1.2 荧光光谱分析法:利用特定物质的荧光特性,对生物分子进行检测和分析。
第二节 层析法
2.1 纸层析法:通过纸介质的吸附作用,分离混合物中的各种成分。
2.2 薄层层析法:适合于小分子的分离,常用于定性分析。
2.3 离子交换层析法:根据离子亲和力,分离带电荷的生物分子。
2.4 凝胶层析法:通过分子大小差异,进行分离和纯化。
第三节 电泳法
3.1 电泳方法分类:包括琼脂糖电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等,是分子生物学的重要工具。
3.2 电泳技术应用:用于蛋白质、核酸等大分子的分离和鉴定。
第四节 离心分离法
4.1 原理与计算:利用离心力分离不同密度的物质,如沉降速度计算。
4.2 制备离心技术:涉及离心机操作和样品处理,保证实验结果的准确性。
4.3 分析超离心:高分辨率技术,用于精细分离复杂样品。
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第二章 蛋白质的分子组成、结构及理化性质分析
此章节深入探讨蛋白质的特性及其在实验中的应用。
第一节 概述
1. 蛋白质分子的定义及其基本特征
2. 蛋白质的分离、纯化和定量方法
3. 纯度鉴定的重要性
4. 序列分析在理解蛋白质功能中的作用
第二节 实验项目
实验一:蛋白质定量测定
Kjeldahl定氮法:测定蛋白质氮含量。
Lowry酚试剂法:蛋白质浓度的快速测定。
紫外光谱吸收法:蛋白质分子结构的初步分析。
考马斯亮蓝染色法:蛋白质纯度的直观评估。
实验二:生物体液和组织蛋白质的分离和鉴定
离子交换层析法:血清IgG的高效分离纯化。
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