使用RPMI1640培养基时,常会遇到的问题主要有变色与添加补充物。变色现象多由培养基中的碳酸氢钠分解生成CO2,导致培养基偏碱性。此情况下,将培养瓶拧松放置于CO2培养箱一段时间,可使颜色恢复正常。此外,当PH值偏高时,酚红成分会改变颜色。酸碱度的变化,由细胞在培养基中产生的代谢产物导致。RPMI1640培养基变色的根本原因在于其PH值变化,当PH值大于7时,呈现紫色;反之,PH值小于7时,颜色变为黄色。
在RPMI1640培养基中添加补充物,旨在满足不同细胞类型的需求。如添加酚红,以直观观察PH值变化,有利于及时调节PH值。添加双抗溶液,可防止细胞污染。10%胎牛血清的添加,为培养基提供丰富的生长因子与营养成分,适合于需要高营养水平的细胞培养。添加补充物的选择,依据实验设计与目的。
在使用与配制RPMI1640培养基过程中,还可能遇到其他问题,如培养基配方、出现沉淀等。这些问题将在后续文章中进行深入探讨。总之,RPMI1640培养基是细胞培养实验的基础与关键。正确掌握其配制与使用方法,是取得满意结果的前提。
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