10%-15%（常见为10%）的DMSO或甘油，含10%-20%血清的冻存培养液。
一般来讲血清含量可以在10%-90%之间调整，冻存液中加入血清一方面可以为细胞提供营养，另一方面可以在细胞冻存过程中提供非渗透性保护物质，如蔗糖，白蛋白等从而更好地保护细胞。
有人亲测10%血清冻存细胞，结果证明是可以的，但高血清比例的冻存液更有助于提高细胞活力，此外娇贵的细胞可以适当提高冻存液中血清的比例以保证获得更高的存活率及活力。
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细胞冻存和复苏的原则：
慢冻速融，这样更加有利于保持细胞的活力。冻存细胞不加任何保护剂，会导致细胞内冰晶的产生，从而使细胞产生内源性的机械损伤，引起细胞内环境渗透压，PH，电解质等的改变，进而促使细胞死亡。
常用的冻存保护剂为二甲基亚砜（DMSO）和甘油，冻存细胞时加入保护剂，一方面可以提高细胞膜对水的通透性，另一方面使冰点降低，延缓冻结过程。
缓慢冻存细胞的过程中，加入保护剂可以使细胞内水分渗出到细胞外，一定程度上减少胞内冰晶的产生，而在快速复苏细胞的过程中，能使胞外冰晶迅速融化，防止水分渗入胞内再次形成冰晶而损伤细胞。
参考资料来源：百度百科-细胞冻存
细胞冻存液制作步骤：
1、配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的冻存培养液。
2、取对数生长期的细胞，去除旧培养液，用PBS清洗。
3、去除PBS，加入适量胰蛋白酶（覆盖培养皿表面）把单层生长的细胞消化下来。
4、离心1000rpm，5min。去除胰蛋白酶，加入适量配制好的冻存培养液。
5、用吸管轻轻吹打使细胞均匀，计数，调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml～1×107/ml。
6、将细胞分装入冻存管中，每管1～1.5 ml。
7、在冻存管上标明细胞的名称，冻存时间及操作者。
8、冻存：标准的冻存程序为降温速率-1～-2℃/ min；当温度达-25℃以下时，可增至-5℃到 -10℃/min；到-100℃时，则可迅速浸入液氮中。
参考资料来源：百度百科-细胞冻存
本回答被网友采纳细胞冻存液的配置成分及比例：
细胞冻存液是含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的冻存培养液。在冻存前一天最好换一次培养液。
配置方法：
1、将DMSO和小牛血清加入培养液中，各自含量占总体积的10%；
2、然后用滤膜过滤配置好的细胞冻存液；
3、用专用保存瓶分装保存备用即可。
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细胞冻存液中的配制注意事项：
1.DMSO不用高压灭菌;DMEM不能高温高压灭菌，可以过滤除菌。
2.DMSO要用新的 ,而且要避光保存。
3.DMSO是含10%FBS的DMEM=1:9(体积比)。
4.取用冻存液均要在超净工作台内无菌操作。
5.初次使用融化后可在2-8℃避光保存至少1个月，少量蛋白析出不影响冻存效果。
6.冻存时从室温可快速降到0℃，再降温时一般按每分钟降温1～2℃，待降至-70℃以下时可放入液氮中，在液氮中细胞可保存数年或更长时间。
参考资料：百度百科——细胞冻存
本回答被网友采纳1.预先配制冻存液：10 % DMSO + 90%胎牛血清,4℃冰箱保存预冷；
2.用胰酶对细胞进行消化：倒去培养瓶中的培养基或用枪小心吸去培养板中的培养基,PBS冲洗两次,用胰酶消化细胞（尽可能温和）；
3.再次用完全培养液悬浮细胞,将预冷的冻存液加入消化完全的细胞中,用滴管轻轻吹打混匀.
4.在每支冻存管中加入1ml细胞液,密封后标记冻存细胞名称和冻存日期.
5.冻存步骤的细致直接关系到细胞复苏时的活力,如果有程序降温器（放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐）最好；或者可以在4℃,2h；然后转到-20℃,2h；-80℃,2h；放入液氮罐.
这是我实验中用的protocol,本回答被网友采纳