粪大肠菌群多管发酵法阳性菌株的菌悬液怎么配制？

Question

如题所述

Answer 1

配制类大肠菌群多管发酵法阳性菌株的菌悬液，一般需要按照以下步骤进行：

1. 准备培养基：制备类大肠菌群多管发酵法的培养基，通常使用牛肉膏蛋白胨培养基或是葡萄糖胨大豆琼脂培养基。

2. 接种：将阳性菌株接种到培养基表面，用无菌钳子或接种环进行接种。

3. 孵育：将接种好的培养基放置在恒温培养箱中孵育，通常在37℃下孵育16-24小时。

4. 洗涤：孵育完成后，将平板上的菌落用无菌水进行洗涤，以去除表面的其它菌落或细菌。

5. 制备菌悬液：使用无菌的移液器，将洗涤后的菌落加入到离心管中，并加入适量的无菌水或是无血清培养基，轻轻振荡混合均匀。

6. 离心：将混合均匀后的菌悬液放入离心机中，以500g离心10-15分钟。

7. 接种：将离心后的菌液倒入无菌培养皿中，并加入适量的无菌水或是无血清培养基，使菌液形成均匀的菌悬液。

8. 孵育：将接种好的菌悬液放置在恒温培养箱中孵育，通常在37℃下孵育16-24小时。

9. 测定：最后，对孵育后的菌悬液进行生物学测定，例如生化反应、分离纯化等，以确定其是否为阳性菌株。

需要注意的是，在整个操作过程中，应严格遵循无菌操作规程，以避免污染和交叉感染的发生。同时，为了确保测定结果的准确性，建议使用新鲜制备的培养基和菌悬液，并在适宜的时间内完成测定。

Answer 2

粪大肠菌是在消化系统中生活的一种细菌，通常需要使用群多管发酵法来检测它们的存在。菌悬液是指将菌落培养物转移到石英管中，然后将其悬浮在生理盐水中，得到的液体。
以下是粪大肠菌群多管发酵法阳性菌株的菌悬液的配制步骤：
1. 首先，将菌落取下并转移到无菌的石英管中。
2. 加入1ml的生理盐水到石英管中，用无菌棉签搅拌使菌落充分悬浮。
3. 将菌悬液转移到试管中，用生理盐水调整至10ml左右。
4. 在菌悬液和生理盐水的比例中，通常是1:9或1:10。可以根据实验的需要进行调节。
5. 在试管中充分混匀，可以在37℃的恒温箱中培养菌株，培养时间为18时~24时之间。
6. 培养结束后，通过比色法可以测定悬液的浓度，根据需要可以使用相应的稀释液进一步稀释或使用。
需要注意的是，悬浮过程需要完全无菌操作。在稀释悬液时，要确保使用无菌的稀释液和设备，以避免交叉感染。同时，实验过程中要注意安全，避免感染和污染，以保护自己和他人的健康。