常用微生物培养基的制备需要掌握哪些问题

Question

如题所述

Answer 1

【注意事项】

1、培养基的调配溶解：现在锥形瓶底加入少量水，再加入蛋白胨等成分，以防其粘瓶底烧结。制备大量培养基时，除玻璃容器外，还可用铝锅、搪瓷桶，但不可用铜铁容器，以免其离子进入培养基（培养基中铜含量超过0.3g/L 会抑制细菌生长，含铁量超过0.14mg/L时会抑制细菌毒素产生）。如需在培养基中加染料、胆盐、指示剂等成分时，应在校正pH后加入

2、培养基的澄清：如需制备澄清的培养基，可用卵蛋白加热澄清法：取一个蛋的卵蛋白加水20mL，搅拌至出现泡沫，倒入1000mL液体或融化的固体培养基中，混匀，然后在流动蒸汽中加热30~60 min，使培养基中的不溶性物质附着于凝固蛋白，取出后以纱布夹脱脂棉过滤固体培养基，或以纱布夹滤纸过滤液体或半固体培养基。

3、平板的浇注

①倾注培养基时，切勿将皿盖全部开启，以防止空气中尘埃和细菌的混入；

②倾注培养基时应注意温度。温度过高，则冷凝水过多易导致污染，不易分离得到菌落；温度过低，部分琼脂凝固，倾注平板表面高低不平。

③在无菌室或接种罩内倾注培养基后，将皿盖稍开一缝隙，在紫外灯照射下待凝，这样利于蒸气散发，减少平板内的冷凝水。

④倾注血液琼脂时，由于加血时琼脂表面容易产生气泡，故倾注时适时转动锥形瓶，使气泡附于瓶壁，以减少血平板表面的气泡。