BrdU检测细胞增殖的方法有哪些？

Question

如题所述

Answer 1

细胞增殖的检验方法：BrdU标记法\x0d\x0a\x0d\x0a1、细胞以1.5×105/ml细胞数接种于直径35ml培养皿中（内放置一盖玻片），培养1天，用含0.4％FCS培养液同步化3天，使绝大多数细胞处于G0期。\x0d\x0a\x0d\x0a2、终止细胞培养前，加入BrdU（终浓度为30μg/L），37℃，孵育40min。\x0d\x0a\x0d\x0a3、弃培养液，玻片用PBS洗涤3次。\x0d\x0a\x0d\x0a4、甲醇/醋酸固定10min。\x0d\x0a\x0d\x0a5、经固定的玻片空气干燥，0.3％H2O2-甲醇30min灭活内源性氧化酶。\x0d\x0a\x0d\x0a6、5％正常兔血清封闭。\x0d\x0a\x0d\x0a7、甲酰胺100℃，5min变性核酸。\x0d\x0a\x0d\x0a8、冰浴冷却后PBS洗涤，加1抗即抗小鼠BrdU单抗（工作浓度1：50），阴性对照加PBS或血清。\x0d\x0a\x0d\x0a9、按ABC法进行检测，苏木素或伊红衬染，在显微镜下随机计数10个高倍视野中细胞总数及BrdU阳性细胞数，计算标记指数（LI）。

Answer 2

细胞增殖的检验方法：BrdU标记法

1、细胞以1.5×105 /ml细胞数接种于直径35ml培养皿中（内放置一盖玻片），培养1天，用含0.4％FCS培养液同步化3天，使绝大多数细胞处于G0 期。

2、终止细胞培养前，加入BrdU（终浓度为30μg/L），37℃，孵育40min。

3、弃培养液，玻片用PBS洗涤3次。

4、甲醇/醋酸固定10min。

5、经固定的玻片空气干燥，0.3％H2 O2 -甲醇30min灭活内源性氧化酶。

6、5％正常兔血清封闭。

7、甲酰胺100℃，5min变性核酸。

8、冰浴冷却后PBS洗涤，加1抗即抗小鼠BrdU单抗（工作浓度1：50），阴性对照加PBS或血清。

9、按ABC法进行检测，苏木素或伊红衬染，在显微镜下随机计数10个高倍视野中细胞总数及BrdU阳性细胞数，计算标记指数（LI）。本回答被网友采纳